AKATA

Bunková línia AKATA, odvodená od Burkittovho lymfómu, je široko používaným modelom na štúdium latencie a reaktivácie vírusu Epsteina-Barrovej (EBV). EBV je všadeprítomný herpesvírus, ktorý je spojený s celým radom nádorových ochorení vrátane Burkittovho lymfómu a zvyčajne sa v B-bunkách vytvára latentná infekcia. V bunkách AKATA sa EBV udržiava v epizomálnom stave s programom latencie typu I, pričom exprimuje obmedzený súbor vírusových génov, ako sú EBNA-1, EBER RNA a pravé transkripty BamHI-A (BART). Táto obmedzená expresia génov umožňuje vírusu pretrvávať v hostiteľovi bez toho, aby sa spustil úplný lytický cyklus. Bunky AKATA však môžu byť spustené tak, aby vstúpili do lytickej fázy, v ktorej sa vírus aktívne replikuje a produkuje potomstvo. Táto reaktivácia sa bežne vyvoláva zosieťovaním povrchových imunoglobulínov, čo z buniek AKATA robí vynikajúci nástroj na štúdium dynamiky reaktivácie EBV a regulácie vírusových génov.

Výskum využívajúci bunkovú líniu AKATA skúmal aj vplyv chemoterapeutických látok na reaktiváciu EBV. Napríklad sa ukázalo, že lieky ako etopozid a doxorubicín ovplyvňujú latenciu vírusu. Etopozid indukuje apoptózu v bunkách AKATA, ale reaktivuje EBV menej účinne ako doxorubicín, ktorý podporuje vyššiu úroveň expresie lytických génov a produkciu vírusových potomkov. Okrem toho sa v štúdiách využívajúcich techniky úpravy génov, ako napríklad CRISPR/Cas9, skúmala úloha epigenetických regulátorov v bunkách AKATA. Napríklad vyradenie histónmetyltransferázy EZH2 v bunkách AKATA narúša udržiavanie latencie znížením trimetylácie histónu H3K27, čo vedie k zvýšenej expresii latentných aj lytických génov EBV, ako aj k zvýšenej replikácii vírusu a proliferácii buniek.

Bunky AKATA tiež vykazujú odlišné fenotypové charakteristiky založené na prítomnosti EBV, ako je zvýšená citlivosť na látky indukujúce apoptózu a rozdiely v expresii génov súvisiacich s apoptotickými dráhami. Tieto rozdiely robia z EBV-pozitívnych AKATA buniek účinný model na skúmanie vplyvu EBV na prežívanie hostiteľských buniek, expresiu génov a životný cyklus vírusu, najmä v kontexte vývoja rakoviny a potenciálnych terapeutických zásahov zameraných na malignity spojené s EBV.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke