AKATA

Celična linija AKATA, pridobljena iz Burkittovega limfoma, je pogosto uporabljen model za preučevanje latence in reaktivacije virusa Epstein-Barr (EBV). EBV je vseprisoten herpesvirus, ki je povezan z vrsto rakov, vključno z Burkittovim limfomom, in se običajno latentno okuži v celicah B. V celicah AKATA se EBV ohranja v epizomskem stanju s programom latence tipa I in izraža omejen nabor virusnih genov, kot so EBNA-1, RNA EBER in desni transkripti BamHI-A (BART). To omejeno izražanje genov omogoča virusu, da se ohrani v gostitelju, ne da bi se začel polni litični cikel. Vendar se lahko celice AKATA sprožijo, da preidejo v litično fazo, v kateri se virus aktivno razmnožuje in proizvaja potomce. Ta reaktivacija se običajno sproži z navzkrižnim povezovanjem površinskih imunoglobulinov, zato so celice AKATA odlično orodje za preučevanje dinamike reaktivacije EBV in regulacije virusnih genov.

V raziskavah, ki so uporabljale celično linijo AKATA, so preučevali tudi vpliv kemoterapevtikov na reaktivacijo EBV. Pokazalo se je na primer, da zdravila, kot sta etopozid in doksorubicin, vplivajo na latenco virusa. Etopozid povzroči apoptozo v celicah AKATA, vendar reaktivira EBV manj učinkovito kot doksorubicin, ki spodbuja višjo raven izražanja liričnih genov in proizvodnjo virusnih potomcev. Poleg tega so študije, ki vključujejo tehnike urejanja genov, kot je CRISPR/Cas9, raziskovale vlogo epigenetskih regulatorjev v celicah AKATA. Na primer, izločitev histonske metiltransferaze EZH2 v celicah AKATA z zmanjšanjem trimetilacije histona H3K27 moti vzdrževanje latence, kar vodi v povečano izražanje latentnih in ličnih genov EBV ter povečano razmnoževanje virusa in proliferacijo celic.

Celice AKATA kažejo tudi različne fenotipske značilnosti glede na prisotnost EBV, kot so večja občutljivost na sredstva, ki povzročajo apoptozo, in razlike v izražanju genov, povezanih z apoptotskimi potmi. Zaradi teh razlik so EBV-pozitivne celice AKATA učinkovit model za preučevanje vpliva EBV na preživetje gostiteljskih celic, izražanje genov in življenjski cikel virusa, zlasti v kontekstu razvoja raka in morebitnih terapevtskih posegov, namenjenih malignomom, povezanim z EBV.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo