AKATA

Burkitt'i lümfoomist saadud AKATA rakuliin on laialdaselt kasutatav mudel Epstein-Barri viiruse (EBV) latentsuse ja reaktiveerimise uurimiseks. EBV on üldlevinud herpesviirus, mis on seotud mitmete vähivormidega, sealhulgas Burkitt'i lümfoomiga, ja tavaliselt tekitab B-rakkudes latentse infektsiooni. AKATA rakkudes püsib EBV episomaalses olekus I tüüpi latentsusprogrammiga, ekspresseerides piiratud hulka viiruse geene, nagu EBNA-1, EBER RNAd ja BamHI-A paremale suunatud transkripte (BART). Selline piiratud geeniekspressioon võimaldab viirusel peremeesorganismis püsida ilma täielikku lüütilist tsüklit algatamata. AKATA rakke saab siiski käivitada lüütilisse faasi, kus viirus aktiivselt replitseerub ja toodab järglast. See reaktiveerimine indutseeritakse tavaliselt pinnaimmunoglobuliinide ristsidumise kaudu, mis muudab AKATA rakud suurepäraseks vahendiks EBV reaktiveerimise dünaamika ja viiruse geenide regulatsiooni uurimiseks.

AKATA rakuliini kasutades on uuritud ka keemiaravimite mõju EBV reaktiveerimisele. Näiteks on näidatud, et sellised ravimid nagu etoposiid ja doksorubitsiin mõjutavad viiruse latentsust. Etoposiid kutsub AKATA rakkudes esile apoptoosi, kuid reaktiveerib EBV vähem tõhusalt kui doksorubitsiin, mis soodustab lüütilise geeni suuremat ekspressiooni ja viiruse järglaste tootmist. Lisaks on geenitöötlustehnikaid, nagu CRISPR/Cas9, hõlmavates uuringutes uuritud epigeneetiliste regulaatorite rolli AKATA rakkudes. Näiteks histoonmetüültransferaasi EZH2 välja lülitamine AKATA rakkudes häirib latentsuse säilitamist, vähendades histooni H3K27 trimetüleerimist, mis viib nii latentsete kui ka lüütiliste EBV geenide suurenenud ekspressiooni, samuti suurenenud viiruse replikatsiooni ja rakkude proliferatsiooni.

AKATA rakkudel on ka erinevad fenotüüpilised omadused, mis põhinevad EBV olemasolul, näiteks suurenenud tundlikkus apoptoosi indutseerivate ainete suhtes ja erinevused apoptootiliste radadega seotud geeniekspressioonis. Need erinevused muudavad EBV-positiivsed AKATA rakud võimsaks mudeliks, mille abil saab uurida EBV mõju peremeesraku ellujäämisele, geeniekspressioonile ja viiruse elutsüklile, eriti vähi arengu ja võimalike EBV-ga seotud pahaloomuliste haiguste vastu suunatud terapeutiliste sekkumiste kontekstis.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest