B-LCL-HROC57

B-LCL-HROC57 הוא קו תאים לימפוציטואידיים אנושיים שהונצחו על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) שהוקם מתאי B החודרים לגידול (TiBc) שהופקו מקרצינומה קולורקטלית ראשונית המכונה HROC57. הגידול המקורי מקורו בחולה בוגר עם קרצינומה קולורקטלית בצד ימין, שהציגה הבחנה נוירואנדוקרינית ומחלה בשלב מתקדם. רקמת הגידול הטרייה הופרדה מכנית כדי להשיג תמיסות של תאים בודדים, ותאי B הונצחו באופן סלקטיבי במבחנה באמצעות supernatant המכיל EBV שמקורו בקו תאים B95/8 marmoset בנוכחות cyclosporin A כדי לעכב את צמיחת תאי T ו-NK. התרחבות ארוכת טווח הניבה תרבות תאי B מונוקלונליים יציבה, כפי שאושר על ידי ניתוח של שינוי גנים של אימונוגלובולינים.

B-LCL-HROC57 מפריש אימונוגלובולין G (IgG) כאיזוטופ הבלעדי שלו, עם ייצור יציב לאורך תרבות ממושכת. בבדיקות קישור מבוססות תאים, IgG שמקורו ב-B-LCL-HROC57 מפגין קישור מדיד לקווי תאים של קרצינומה קולורקטלית אלוגנית, עם עוצמת קישור בינונית ביחס ל-IgG אחרים שמקורם ב-TiBc. ניתוחי אימונופלואורסצנציה מצביעים על זיהוי יעד תאי בעיקר בתאי הגידול. לא מתרחשת צמיחה ספונטנית של תאי B בהיעדר EBV אקסוגני במהלך הקמת התרבית, מה שמבטל טרנספורמציה סמויה המונעת על ידי EBV in vivo. כקו תאים B חד-שבטי, המוכר את האנטיגן, החודר לגידול, B-LCL-HROC57 מייצג מודל מוגדר לחקר תגובות חיסוניות הומורליות בקרצינומה של המעי הגס ולזיהוי אנטיגנים הקשורים לגידול המוכרים על ידי שיבוטים של תאי B המתרחבים מקומית.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו