B-LCL-HROC57

Το B-LCL-HROC57 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά Β λεμφοβλαστικών κυττάρων που έχει αθανατοποιηθεί από τον ιό Epstein-Barr (EBV) και έχει δημιουργηθεί από Β κύτταρα που διεισδύουν σε όγκους (TiBc) που έχουν απομονωθεί από ένα πρωτοπαθές καρκίνωμα του παχέος εντέρου με την ονομασία HROC57. Ο γονικός όγκος προήλθε από έναν ενήλικα άνδρα ασθενή με καρκίνωμα του παχέος εντέρου στη δεξιά πλευρά που παρουσίαζε νευροενδοκρινική διαφοροποίηση και προχωρημένο στάδιο της νόσου. Ο φρέσκος όγκος διαχωρίστηκε μηχανικά για να ληφθούν εναιωρήματα μονών κυττάρων και τα Β κύτταρα αθανατοποιήθηκαν επιλεκτικά in vitro χρησιμοποιώντας υπερκείμενο που περιείχε EBV και προέρχονταν από την κυτταρική σειρά B95/8 marmoset παρουσία κυκλοσπορίνης Α για την αναστολή της ανάπτυξης Τ και ΝΚ κυττάρων. Η μακροχρόνια επέκταση απέδωσε μια σταθερή μονοκλωνική καλλιέργεια Β κυττάρων, όπως επιβεβαιώθηκε από την ανάλυση αναδιάταξης του γονιδίου της ανοσοσφαιρίνης.

Το B-LCL-HROC57 εκκρίνει ανοσοσφαιρίνη G (IgG) ως αποκλειστικό ισοτύπο, με σταθερή παραγωγή κατά τη διάρκεια παρατεταμένης καλλιέργειας. Σε δοκιμασίες σύνδεσης με βάση τα κύτταρα, η IgG που προέρχεται από το B-LCL-HROC57 παρουσιάζει μετρήσιμη σύνδεση με αλλογενείς κυτταρικές σειρές καρκίνου του παχέος εντέρου, με ενδιάμεση ένταση σύνδεσης σε σχέση με άλλες IgG που προέρχονται από TiBc. Οι αναλύσεις ανοσοφθορισμού δείχνουν κυρίως ενδοκυτταρική αναγνώριση στόχου σε καρκινικά κύτταρα. Δεν παρατηρείται αυθόρμητη ανάπτυξη Β-κυττάρων απουσία εξωγενούς EBV κατά τη διάρκεια της καλλιέργειας, αποκλείοντας την ενδογενή μετασχηματισμό που προκαλείται από τον EBV in vivo. Ως μονοκλωνική, αντιγονικά έμπειρη σειρά Β-κυττάρων που διεισδύουν στον όγκο, το B-LCL-HROC57 αντιπροσωπεύει ένα καθορισμένο μοντέλο για τη διερεύνηση των χυμικών ανοσολογικών αποκρίσεων στο καρκίνωμα του παχέος εντέρου και για την αναγνώριση των αντιγόνων που σχετίζονται με τον όγκο και αναγνωρίζονται από τοπικά επεκταθέντες κλώνους Β-κυττάρων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης