B-LCL-HROC57

B-LCL-HROC57系一种由原发性结直肠癌（命名为HROC57）中分离的肿瘤浸润性B细胞（TiBc）建立的、经爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）永生化的人B淋巴母细胞样细胞系。该亲本肿瘤源自一名成年男性患者，其右侧结直肠癌表现出神经内分泌分化特征且处于晚期阶段。 通过机械分离新鲜肿瘤组织获得单细胞悬液，在环孢素A抑制T细胞和NK细胞增殖的条件下，利用源自B95/8松鼠猴细胞系的含EBV上清液进行体外选择性永生化处理。长期扩增后获得稳定的单克隆B细胞培养系，经免疫球蛋白基因重排分析确认。

B-LCL-HROC57细胞系仅分泌免疫球蛋白G（IgG）亚型，且在长期培养中保持稳定产率。 在细胞结合实验中，B-LCL-HROC57衍生的IgG对所有异源性结直肠癌细胞系均表现出可测量的结合能力，其结合强度介于其他TiBc衍生的IgG之间。免疫荧光分析表明，该抗体主要在肿瘤细胞内实现靶标识别。 在建立培养体系时，若无外源性EBV存在，则不会发生自发性B细胞增殖，这排除了体内潜伏性EBV驱动的转化。作为单克隆、具有抗原经验的肿瘤浸润性B细胞系，B-LCL-HROC57是研究结肠直肠癌体液免疫反应和鉴定被局部扩增B细胞克隆识别的肿瘤相关抗原的明确模型。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。