B-LCL-HROC57

B-LCL-HROC57 je ľudská B-lymfoblastová bunka imortalizovaná vírusom Epstein-Barrov (EBV), vytvorená z B-buniek infiltrujúcich nádor (TiBc) izolovaných z primárneho kolorektálneho karcinómu označeného ako HROC57. Pôvodný nádor pochádzal od dospelého mužského pacienta s pravostranným kolorektálnym karcinómom vykazujúcim neuroendokrinnú diferenciáciu a pokročilým štádiom ochorenia. Čerstvá nádorová tkanina bola mechanicky disociovaná, aby sa získali suspenzie jednotlivých buniek, a B bunky boli selektívne imortalizované in vitro pomocou supernatantu obsahujúceho EBV odvodeného z bunky B95/8 marmoset v prítomnosti cyklosporínu A na inhibíciu rastu T a NK buniek. Dlhodobá expanzia viedla k stabilnej monoklonálnej kultúre B buniek, čo potvrdila analýza rearanžovania génu imunoglobulínu.

B-LCL-HROC57 vylučuje imunoglobulín G (IgG) ako svoj výhradný izotyp so stabilnou produkciou počas dlhodobej kultivácie. V bunkových viazacích testoch IgG odvodený z B-LCL-HROC57 vykazuje merateľnú väzbu na alogénne bunky kolorektálneho karcinómu s priemernou intenzitou väzby v porovnaní s inými IgG odvodenými z TiBc. Imunofluorescenčné analýzy naznačujú prevažne intracelulárne rozpoznávanie cieľa v nádorových bunkách. Pri absencii exogénneho EBV počas kultivácie nedochádza k spontánnemu rastu B-buniek, čo vylučuje latentnú transformáciu spôsobenú EBV in vivo. Ako monoklonálna, antigénom skúsená tumorom infiltrovaná B-bunka, B-LCL-HROC57 predstavuje definovaný model na skúmanie humorálnych imunitných reakcií v kolorektálnom karcinóme a na identifikáciu tumorových antigénov rozpoznávaných lokálne expandovanými klonmi B-buniek.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke