B-LCL-HROC57

B-LCL-HROC57 er en Epstein-Barr-virus (EBV)-immortaliseret human B-lymfoblastoidcellelinje etableret fra tumorinfiltrerende B-celler (TiBc) isoleret fra et primært kolorektalt karcinom benævnt HROC57. Den oprindelige tumor stammede fra en voksen mandlig patient med højresidet kolorektalt karcinom, der udviste neuroendokrin differentiering og fremskreden sygdom. Friskt tumorvæv blev mekanisk dissocieret for at opnå enkeltcellesuspensioner, og B-celler blev selektivt immortaliseret in vitro ved hjælp af EBV-holdigt supernatant afledt af B95/8-marmosetcellelinjen i nærværelse af cyclosporin A for at hæmme T- og NK-celleudvækst. Langvarig ekspansion resulterede i en stabil monoklonal B-cellekultur, hvilket blev bekræftet ved immunoglobulin-genomlejringsanalyse.

B-LCL-HROC57 udskiller immunoglobulin G (IgG) som sin eksklusive isotype med stabil produktion over længerevarende kultur. I cellebaserede bindingsassays viser IgG afledt af B-LCL-HROC57 målbar binding til allogene kolorektale carcinomcellelinjer med en mellemliggende bindingsintensitet i forhold til andre TiBc-afledte IgG'er. Immunfluorescensanalyser indikerer overvejende intracellulær målgenkendelse i tumorceller. Der forekommer ingen spontan B-celleudvækst i fravær af eksogent EBV under kultur etablering, hvilket udelukker latent EBV-drevet transformation in vivo. Som en monoklonal, antigen-erfaren tumor-infiltrerende B-cellelinje repræsenterer B-LCL-HROC57 en defineret model til undersøgelse af humorale immunresponser i kolorektal karcinom og til identifikation af tumorassocierede antigener, der genkendes af lokalt ekspanderede B-cellekloner.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring