B-LCL-HROC57

B-LCL-HROC57 on Epstein-Barr-viruksen (EBV) avulla ikuistettu ihmisen B-lymfoblastoidinen solulinja, joka on perustettu primaarisesta kolorektaalisesta karsinoomasta eristetyistä tuumoriin tunkeutuneista B-soluista (TiBc), nimeltään HROC57. Emotuumori oli peräisin aikuiselta miespotilaalta, jolla oli oikeanpuoleinen kolorektaalinen karsinooma, jossa oli neuroendokriininen erilaistuminen ja joka oli edennyt pitkälle. Tuore kasvainkudos hajotettiin mekaanisesti yksisoluisten suspensioiden saamiseksi, ja B-solut immortalisoitiin selektiivisesti in vitro käyttämällä EBV:tä sisältävää supernatanttia, joka oli peräisin B95/8-marmosettisolulinjasta, syklosporiini A:n läsnä ollessa T- ja NK-solujen kasvun estämiseksi. Pitkäaikainen laajentaminen tuotti stabiilin monoklonaalisen B-soluviljelmän, mikä vahvistettiin immunoglobuliinigeenien uudelleenjärjestelyanalyysillä.

B-LCL-HROC57 erittää immunoglobuliini G:tä (IgG) ainoana isotyyppinään, ja tuotanto on vakaata pitkittyneen viljelyn aikana. Solupohjaisissa sitoutumistesteissä B-LCL-HROC57:stä peräisin oleva IgG osoittaa mitattavissa olevaa sitoutumista allogeenisiin kolorektaalisyöpäsolulinjoihin, ja sen sitoutumisintensiteetti on keskitasoinen verrattuna muihin TiBc:stä peräisin oleviin IgG:ihin. Immunofluoresenssianalyysit osoittavat pääasiassa solunsisäisen kohteen tunnistamisen kasvainsoluissa. Viljelyn aloittamisen aikana ei tapahdu spontaania B-solujen kasvua ilman eksogeenistä EBV:tä, mikä sulkee pois latentti EBV:n aiheuttaman transformaation in vivo. Monoklonaalisena, antigeenikokemusta omaavana tuumoriin tunkeutuvana B-solulinjana B-LCL-HROC57 edustaa määriteltyä mallia kolorektaalisen karsinooman humoraalisen immuunivasteen tutkimiseen ja paikallisesti laajentuneiden B-solukloonien tunnistamien tuumoriin liittyvien antigeenien tunnistamiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa