B-LCL-HROC57

B-LCL-HROC57 هو خط خلايا ليمفوبلاستويدية بشرية خالدة بفيروس إبشتاين-بار (EBV) تم إنشاؤه من خلايا B المتسللة إلى الورم (TiBc) المعزولة من سرطان القولون والمستقيم الأولي المسمى HROC57. نشأ الورم الأصلي من مريض بالغ من الذكور مصاب بسرطان القولون والمستقيم في الجانب الأيمن يظهر تمايزًا عصبيًا هرمونيًا ومرضًا في مرحلة متقدمة. تم فصل أنسجة الورم الطازجة ميكانيكيًا للحصول على معلقات خلايا مفردة، وتم تخليد الخلايا B بشكل انتقائي في المختبر باستخدام طاف يحتوي على فيروس إبشتاين-بار مشتق من خط خلايا المرموسيت B95/8 في وجود سيكلوسبورين A لتثبيط نمو الخلايا T و NK. أسفر التوسع طويل الأمد عن ثقافة خلايا B أحادية النسيلة مستقرة، كما تم تأكيده من خلال تحليل إعادة ترتيب جينات الغلوبولين المناعي.

يُفرز B-LCL-HROC57 الغلوبولين المناعي G (IgG) باعتباره النمط الفريد له، مع إنتاج مستقر خلال فترة استزراع طويلة. في اختبارات الارتباط الخلوي، يُظهر IgG المشتق من B-LCL-HROC57 ارتباطًا قابلًا للقياس بخطوط خلايا سرطان القولون والمستقيم الخيفي، مع كثافة ارتباط متوسطة مقارنة بـ IgG المشتق من TiBc. تشير تحليلات المناعة الفلورية إلى التعرف على الأهداف داخل الخلايا بشكل أساسي في الخلايا السرطانية. لا يحدث نمو تلقائي للخلايا B في غياب فيروس EBV خارجي أثناء إنشاء الثقافة، باستثناء التحول الكامن الذي يحركه فيروس EBV في الجسم الحي. باعتباره خط خلايا B أحادية النسيلة، متمرسة في مسببات الأمراض، ومتسللة إلى الأورام، يمثل B-LCL-HROC57 نموذجًا محددًا لدراسة الاستجابات المناعية الخلطية في سرطان القولون والمستقيم ولتحديد مسببات الأمراض المرتبطة بالأورام التي تتعرف عليها نسخ الخلايا B الموسعة محليًا.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان