EO771
Cell line · Product number 305352
EO771 is a murine mammary cancer cell line derived from spontaneous tumors in C57BL/6 mice. This line serves as an important preclinical model for studyin...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
EO771 הוא קו תאים של סרטן השד בעכברים, שמקורו בגידולים ספונטניים בעכברי C57BL/6. קו זה משמש כמודל פרה-קליני חשוב לחקר סרטן השד בסביבה חיסונית, בשל תאימותו למודלים של עכברי C57BL/6 סינגניים. מודלים אלה מקלים על חקר האינטראקציות בין תאי הגידול למערכת החיסון, ומספקים תובנות לגבי צמיחת הגידול והגרורות.
תאי EO771 מסווגים כתת-סוג לומנלי B, המאופיין בכך שהוא שלילי לקולטן אסטרוגן אלפא (ERα), חיובי לקולטן אסטרוגן בטא (ERβ), חיובי לקולטן פרוגסטרון וחיובי ל-ErbB2 (HER2). סיווג זה תואם לגידולים לומנליים B הנמצאים בבני אדם, שלעתים קרובות הם בעלי פרוגנוזה גרועה יותר בהשוואה לסוגים לומנליים A. סטטוס ה-luminal B של EO771 הופך אותו לרלוונטי לחקר תגובות לטיפול הורמונלי; מחקרים הראו את רגישות קו התאים לטיפולים אנטי-אסטרוגניים כגון טמוקסיפן ומודולטורים סלקטיביים אחרים של קולטני אסטרוגן.
בנוסף לתכונותיו הפנוטיפיות, EO771 הוכח כשימושי למחקרים על גרורות של גידולים ומודולציה של התגובה החיסונית. התנהגותו הגרורתית משקפת את זו של סרטן השד בבני אדם, עם התפשטות תכופה לריאות ולאתרים אחרים, כגון הצפק והמוח. תכונות אלה הופכות את EO771 למודל חשוב להערכת היעילות של טיפולים חדשים נגד סרטן ולהבנת הדינמיקה בין הגידול למערכת החיסון.
- Tissue
- בלוטת חלב
- Disease
- גידול ממאיר
- Synonyms
- Eo771
- E0771
- EO 771
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- EO771 (מספר קטלוגי Cytion 305352)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_GR23
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- ERalpha-, ERbeta+, PR+ ו-ErbB2+
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, 20 mM HEPES
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- שמרו על תרבויות בין 5 - 10 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
