Przejdź do treści
EO771
Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Nowotwór złośliwy
Synonimy
Eo771, E0771, EO 771

Dokumenty

EO771

Cell line · Numer produktu 305352

EO771 to mysia linia komórkowa raka sutka wyhodowana z nowotworów spontanicznych u myszy C57BL/6. Linia ta stanowi ważny model przedkliniczny do badań nad...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

EO771 to linia komórek mysiego raka sutka pochodząca ze spontanicznych guzów u myszy C57BL/6. Linia ta służy jako ważny model przedkliniczny do badania raka piersi w warunkach immunokompetentnych, ze względu na jej kompatybilność z syngenicznymi modelami myszy C57BL/6. Modele te ułatwiają badanie interakcji między komórkami nowotworowymi a układem odpornościowym, zapewniając wgląd we wzrost guza i przerzuty.

Komórki EO771 są klasyfikowane jako podtyp luminalny B, charakteryzujący się ujemnym receptorem estrogenowym alfa (ERα), dodatnim receptorem estrogenowym beta (ERβ), dodatnim receptorem progesteronowym i dodatnim receptorem ErbB2 (HER2). Klasyfikacja ta jest zgodna z guzami luminalnymi B występującymi u ludzi, które często mają gorsze rokowania w porównaniu z typami luminalnymi A. Status luminalny B EO771 sprawia, że jest on istotny dla badania odpowiedzi na terapię hormonalną; badania wykazały wrażliwość linii komórkowej na leczenie antyestrogenowe, takie jak tamoksyfen i inne selektywne modulatory receptora estrogenowego.

Oprócz cech fenotypowych, EO771 okazał się przydatny w badaniach nad przerzutami nowotworów i modulacją odpowiedzi immunologicznej. Jego zachowanie przerzutowe odzwierciedla zachowanie ludzkiego raka piersi, z częstym rozprzestrzenianiem się do płuc i innych miejsc, takich jak otrzewna i mózg. Te cechy sprawiają, że EO771 jest cennym modelem do oceny skuteczności nowych metod leczenia przeciwnowotworowego i zrozumienia dynamiki układu odpornościowego guza.

Chusteczka
Gruczoł sutkowy
Choroba
Nowotwór złośliwy
Synonimy
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka

04Identyfikatory

Źródło
EO771 (numer katalogowy Cytion 305352)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
ERalpha-, ERbeta+, PR+ i ErbB2+

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS, 20 mM HEPES
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Utrzymuj kultury w zakresie od 5 do 10 x 104 komórek/cm2.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6