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EO771
Pañuelo de papel
Glándula mamaria
Enfermedad
Neoplasia maligna
Sinónimos
Eo771, E0771, EO 771

Documentos

EO771

Cell line · Número de producto 305352

La EO771 es una línea celular de cáncer de mama murino derivada de tumores espontáneos en ratones C57BL/6. Esta línea constituye un importante modelo preclínico para el estudio de...

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01Información general

Descripción

EO771 es una línea celular murina de cáncer de mama derivada de tumores espontáneos en ratones C57BL/6. Esta línea constituye un importante modelo preclínico para el estudio del cáncer de mama en un entorno inmunocompetente, debido a su compatibilidad con modelos de ratones C57BL/6 singénicos. Estos modelos facilitan la exploración de las interacciones entre las células tumorales y el sistema inmunitario, proporcionando información sobre el crecimiento tumoral y la metástasis.

Las células EO771 se clasifican como subtipo luminal B, caracterizado por ser receptor de estrógeno alfa (ERα) negativo, receptor de estrógeno beta (ERβ) positivo, receptor de progesterona positivo y ErbB2 (HER2) positivo. Esta clasificación coincide con la de los tumores luminales B encontrados en humanos, que suelen tener peor pronóstico que los tipos luminales A. El estatus luminal B del EO771 lo hace relevante para investigar las respuestas a la terapia hormonal; los estudios han demostrado la sensibilidad de la línea celular a los tratamientos antiestrogénicos como el tamoxifeno y otros moduladores selectivos de los receptores de estrógenos.

Además de sus rasgos fenotípicos, EO771 ha demostrado su utilidad en estudios sobre la metástasis tumoral y la modulación de la respuesta inmunitaria. Su comportamiento metastásico refleja el del cáncer de mama humano, con diseminación frecuente a los pulmones y otros lugares, como el peritoneo y el cerebro. Estos atributos convierten al EO771 en un valioso modelo para evaluar la eficacia de nuevos tratamientos contra el cáncer y comprender la dinámica tumor-sistema inmunitario.

Pañuelo de papel
Glándula mamaria
Enfermedad
Neoplasia maligna
Sinónimos
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
EO771 (número de catálogo 305352 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
ERalpha-, ERbeta+, PR+ y ErbB2+

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Completar el medio con 10% FBS, 20 mM HEPES
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
Mantenga cultivos entre 5 y 10 x 104 células/cm2.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C57BL/6