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EO771
Gewebe
Brustdrüse
Krankheit
Bösartiges Neoplasma
Synonyme
Eo771, E0771, EO 771

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EO771

Cell line · Artikelnummer 305352

EO771 ist eine Maus-Brustkrebszelllinie, die aus spontanen Tumoren bei C57BL/6-Mäusen gewonnen wurde. Diese Zelllinie dient als wichtiges präklinisches Modell für die Untersuchung von...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

EO771 ist eine murine Mammakarzinom-Zelllinie, die aus spontanen Tumoren in C57BL/6-Mäusen gewonnen wird. Aufgrund ihrer Kompatibilität mit syngenen C57BL/6-Mausmodellen dient diese Linie als wichtiges präklinisches Modell für die Untersuchung von Brustkrebs in einem immunkompetenten Umfeld. Diese Modelle erleichtern die Erforschung der Wechselwirkungen zwischen Tumorzellen und dem Immunsystem und ermöglichen Einblicke in das Tumorwachstum und die Metastasierung.

EO771-Zellen werden als luminaler B-Subtyp klassifiziert, der dadurch gekennzeichnet ist, dass er Östrogenrezeptor alpha (ERα) negativ, Östrogenrezeptor beta (ERβ) positiv, Progesteronrezeptor positiv und ErbB2 (HER2) positiv ist. Diese Klassifizierung entspricht den luminalen B-Tumoren beim Menschen, die im Vergleich zu luminalen A-Typen häufig eine schlechtere Prognose haben. Der Luminal-B-Status von EO771 macht ihn relevant für die Untersuchung des Ansprechens auf Hormontherapien; Studien haben gezeigt, dass die Zelllinie empfindlich auf Anti-Östrogen-Behandlungen wie Tamoxifen und andere selektive Östrogenrezeptormodulatoren reagiert.

Zusätzlich zu seinen phänotypischen Merkmalen hat sich EO771 als nützlich für Studien zur Metastasierung von Tumoren und zur Modulation der Immunantwort erwiesen. Sein Metastasierungsverhalten spiegelt das des menschlichen Brustkrebses wider, mit einer häufigen Verbreitung in die Lunge und in andere Bereiche, wie das Bauchfell und das Gehirn. Diese Eigenschaften machen EO771 zu einem wertvollen Modell für die Bewertung der Wirksamkeit neuer Krebsbehandlungen und für das Verständnis der Dynamik des Tumor-Immunsystems.

Gewebe
Brustdrüse
Krankheit
Bösartiges Neoplasma
Synonyme
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich

04Bezeichner

Quellenangabe
EO771 (Cytion-Katalognummer 305352)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
ERalpha-, ERbeta+, PR+ und ErbB2+

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % FBS, 20 mM HEPES
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
Halten Sie die Kulturen zwischen 5 und 10 x 104 Zellen/cm² aufrecht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6