Mine otse sisu juurde
EO771
Kude
Rinnanäärme
Haigus
Pahaloomuline kasvaja
Sünonüümid
Eo771, E0771, EO 771

Dokumendid

EO771

Cell line · Toote number 305352

EO771 on hiire rinnavähi rakuliin, mis on saadud C57BL/6 hiirte spontaansetest kasvajatest. See rakuliin on oluline prekliiniline mudel uurimistööks...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

EO771 on C57BL/6 hiirte spontaansetest kasvajatest saadud hiirte rinnanäärmevähi rakuliin. See liin on oluline prekliiniline mudel rinnanäärmevähi uurimiseks immunokompetentses keskkonnas, kuna see sobib süngeensete C57BL/6 hiire mudelitega. Need mudelid hõlbustavad kasvajarakkude ja immuunsüsteemi vaheliste vastastikmõjude uurimist, andes ülevaate kasvaja kasvust ja metastaasidest.

EO771 rakud liigitatakse luminaalse B alatüübi alla, mida iseloomustab östrogeeni retseptori alfa (ERα) negatiivsus, östrogeeni retseptori beeta (ERβ) positiivsus, progesterooniretseptori positiivsus ja ErbB2 (HER2) positiivsus. See klassifikatsioon vastab inimestel esinevatele luminaalse B-tüübi kasvajatele, mille prognoos on sageli halvem kui luminaalsel A-tüübil. EO771 luminaalne B-staatus muudab ta oluliseks hormoonravile reageerimise uurimisel; uuringud on näidanud rakuliini tundlikkust östrogeenivastase ravi, näiteks tamoksifeeni ja teiste selektiivsete östrogeeni retseptori modulaatorite suhtes.

Lisaks oma fenotüübilistele omadustele on EO771 osutunud kasulikuks kasvajate metastaasi ja immuunvastuse modulatsiooni uuringutes. Tema metastaatiline käitumine peegeldab inimese rinnavähi käitumist, mis levib sageli kopsudesse ja muudesse kohtadesse, näiteks kõhukelmesse ja ajju. Need omadused muudavad EO771 väärtuslikuks mudeliks uute vähivastaste ravimeetodite tõhususe hindamiseks ja kasvajate ja immuunsüsteemi dünaamika mõistmiseks.

Kude
Rinnanäärme
Haigus
Pahaloomuline kasvaja
Sünonüümid
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
EO771 (Cytioni katalooginumber 305352)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
ERalpha-, ERbeta+, PR+ ja ErbB2+

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 20 mM HEPESiga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Säilitage kultuurid vahemikus 5–10 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6