Přejít na obsah
EO771
Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Zhoubný novotvar
Synonyma
Eo771, E0771, EO 771

Dokumenty

EO771

Cell line · Číslo výrobku 305352

EO771 je myší buněčná linie rakoviny prsu odvozená ze spontánních nádorů u myší kmene C57BL/6. Tato linie slouží jako důležitý předklinický model pro studium...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

EO771 je buněčná linie myšího karcinomu mléčné žlázy odvozená ze spontánních nádorů u myší C57BL/6. Tato linie slouží jako důležitý preklinický model pro studium karcinomu prsu v imunokompetentním prostředí díky své kompatibilitě se syngenními modely myší C57BL/6. Tyto modely usnadňují zkoumání interakcí mezi nádorovými buňkami a imunitním systémem, což umožňuje nahlédnout do růstu nádorů a jejich metastazování.

Buňky EO771 jsou klasifikovány jako luminální podtyp B, který je charakterizován tím, že jsou estrogenový receptor alfa (ERα) negativní, estrogenový receptor beta (ERβ) pozitivní, progesteronový receptor pozitivní a ErbB2 (HER2) pozitivní. Tato klasifikace odpovídá luminálním nádorům B zjištěným u lidí, které mají často horší prognózu ve srovnání s luminálními typy A. Díky tomu, že EO771 má status luminálního nádoru B, je vhodný pro zkoumání reakce na hormonální léčbu; studie prokázaly citlivost buněčné linie na antiestrogenní léčbu, jako je tamoxifen a další selektivní modulátory estrogenových receptorů.

Kromě svých fenotypových vlastností se EO771 ukázala jako užitečná pro studie metastazování nádorů a modulace imunitní odpovědi. Jeho metastatické chování odráží chování lidského karcinomu prsu, s častým šířením do plic a dalších míst, jako je peritoneum a mozek. Díky těmto vlastnostem je EO771 cenným modelem pro hodnocení účinnosti nové protinádorové léčby a pro pochopení dynamiky nádorového a imunitního systému.

Tkáň
Mléčná žláza
Nemoc
Zhoubný novotvar
Synonyma
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
EO771 (katalogové číslo Cytion 305352)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
ERalfa-, ERbeta+, PR+ a ErbB2+

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 20 mM HEPES
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Udržujte kultury mezi 5 - 10 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6