Skip to content
EO771
Tissue
ต่อมน้ำนม
Disease
เนื้องอกมะเร็ง
Synonyms
Eo771, E0771, EO 771

Documents

EO771

Cell line · Product number 305352

EO771 is a murine mammary cancer cell line derived from spontaneous tumors in C57BL/6 mice. This line serves as an important preclinical model for studyin...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

EO771 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านมในหนูที่ได้มาจากเนื้องอกที่เกิดขึ้นเองในหนู C57BL/6 สายพันธุ์นี้ใช้เป็นแบบจำลองก่อนคลินิกที่สำคัญสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งเต้านมในสภาพแวดล้อมที่มีระบบภูมิคุ้มกันสมบูรณ์ เนื่องจากความเข้ากันได้กับแบบจำลองหนู C57BL/6 ที่มีความเหมือนกันทางพันธุกรรม แบบจำลองเหล่านี้ช่วยอำนวยความสะดวกในการสำรวจปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์เนื้องอกและระบบภูมิคุ้มกัน ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการเจริญเติบโตและการแพร่กระจายของเนื้องอก

เซลล์ EO771 ถูกจัดประเภทเป็นชนิดย่อยลูมินัล B ซึ่งมีลักษณะเด่นคือเป็นลบต่อตัวรับเอสโตรเจนแอลฟา (ERα) เป็นบวกต่อตัวรับเอสโตรเจนเบตา (ERβ) เป็นบวกต่อตัวรับโปรเจสเตอโรน และเป็นบวกต่อ ErbB2 (HER2) การจำแนกประเภทนี้สอดคล้องกับเนื้องอกลูมินัล B ที่พบในมนุษย์ ซึ่งมักมีพยากรณ์โรคที่ไม่ดีเมื่อเทียบกับชนิดลูมินัล Aสถานะ luminal B ของ EO771 ทำให้มีความเกี่ยวข้องในการศึกษาการตอบสนองต่อการบำบัดด้วยฮอร์โมน; การศึกษาได้แสดงให้เห็นถึงความไวของสายเซลล์นี้ต่อการรักษาด้วยยาต้านเอสโตรเจน เช่น ทาม็อกซิเฟน และตัวปรับระดับเอสโตรเจนที่เลือกเฉพาะเจาะจงอื่นๆ

นอกเหนือจากลักษณะทางฟีโนไทป์แล้ว EO771 ยังแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ในการศึกษาการแพร่กระจายของเนื้องอกและการปรับเปลี่ยนการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน พฤติกรรมการแพร่กระจายของมันคล้ายคลึงกับมะเร็งเต้านมในมนุษย์ โดยมีการกระจายตัวไปยังปอดและตำแหน่งอื่น ๆ เช่น เยื่อบุช่องท้องและสมองบ่อยครั้ง คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้ EO771 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการประเมินประสิทธิภาพของการรักษาโรคมะเร็งแบบใหม่และทำความเข้าใจพลวัตระหว่างเนื้องอกและระบบภูมิคุ้มกัน

Tissue
ต่อมน้ำนม
Disease
เนื้องอกมะเร็ง
Synonyms
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
EO771 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305352)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ERalpha-, ERbeta+, PR+ และ ErbB2+

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ HEPES 20 mM
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
รักษาวัฒนธรรมระหว่าง 5 - 10 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6