EO771
Cell line · Product number 305352
EO771 is a murine mammary cancer cell line derived from spontaneous tumors in C57BL/6 mice. This line serves as an important preclinical model for studyin...
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01General information
- Description
A EO771 é uma linhagem celular de câncer de mama murino derivada de tumores espontâneos em camundongos C57BL/6. Essa linhagem serve como um importante modelo pré-clínico para o estudo do câncer de mama em um ambiente imunocompetente, devido à sua compatibilidade com modelos de camundongos C57BL/6 singênicos. Esses modelos facilitam a exploração das interações entre as células tumorais e o sistema imunológico, proporcionando insights sobre o crescimento tumoral e a metástase.
As células EO771 são classificadas como subtipo luminal B, caracterizadas por serem negativas para o receptor de estrogênio alfa (ERα), positivas para o receptor de estrogênio beta (ERβ), positivas para o receptor de progesterona e positivas para ErbB2 (HER2). Essa classificação está alinhada com os tumores luminais B encontrados em humanos, que frequentemente apresentam prognósticos mais desfavoráveis em comparação com os tipos luminais A. O status luminal B da EO771 a torna relevante para a investigação de respostas à terapia hormonal; estudos demonstraram a sensibilidade da linhagem celular a tratamentos antiestrogênicos, como o tamoxifeno e outros moduladores seletivos do receptor de estrogênio.
Além de suas características fenotípicas, a EO771 tem se mostrado útil para estudos sobre metástase tumoral e modulação da resposta imunológica. Seu comportamento metastático reflete o do câncer de mama humano, com disseminação frequente para os pulmões e outros locais, como o peritônio e o cérebro. Essas características tornam a EO771 um modelo valioso para avaliar a eficácia de novos tratamentos anticâncer e compreender a dinâmica entre o tumor e o sistema imunológico.
- Tissue
- Glândula mamária
- Disease
- Neoplasia maligna
- Synonyms
- Eo771
- E0771
- EO 771
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
04Identifiers
- Citation
- EO771 (número de catálogo da Cytion 305352)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_GR23
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- ER-alfa, ER-beta+, PR+ e ErbB2+
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS e 20 mM de HEPES
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- Manter as culturas na faixa de 5 a 10 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
