Siirry sisältöön
EO771
Kudos
Rintarauhanen
Sairaus
Pahanlaatuinen kasvain
Synonyymit
Eo771, E0771, EO 771

Asiakirjat

EO771

Cell line · Tuotenumero 305352

EO771 on hiiren rintasyöpäsolulinja, joka on peräisin C57BL/6-hiirten spontaaneista kasvaimista. Tämä linja toimii tärkeänä prekliinisenä mallina tutkimuksessa...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

EO771 on hiiren rintasyövän solulinja, joka on peräisin C57BL/6-hiirten spontaaneista kasvaimista. Tämä linja on tärkeä prekliininen malli rintasyövän tutkimiseen immunokompetentissa ympäristössä, koska se on yhteensopiva syngeenisten C57BL/6-hiirimallien kanssa. Nämä mallit helpottavat kasvainsolujen ja immuunijärjestelmän välisten vuorovaikutusten tutkimista, mikä antaa tietoa kasvaimen kasvusta ja etäpesäkkeistä.

EO771-solut luokitellaan luminaaliseen B-alatyyppiin, jolle on ominaista, että ne ovat estrogeenireseptori alfa (ERα) -negatiivisia, estrogeenireseptori beeta (ERβ) -positiivisia, progesteronireseptori positiivisia ja ErbB2 (HER2) -positiivisia. Tämä luokitus vastaa ihmisillä esiintyviä luminaalisia B-kasvaimia, joiden ennuste on usein huonompi kuin luminaalisten A-tyyppien. EO771:n luminaalinen B-status tekee siitä merkityksellisen hormonihoitovasteiden tutkimisen kannalta; tutkimukset ovat osoittaneet solulinjan herkkyyden estrogeenin vastaisille hoidoille, kuten tamoksifeenille ja muille selektiivisille estrogeenireseptorin modulaattoreille.

Fenotyyppisten ominaisuuksiensa lisäksi EO771 on osoittautunut hyödylliseksi kasvainten etäpesäkkeitä ja immuunivasteen modulointia koskevissa tutkimuksissa. Sen metastaattinen käyttäytyminen heijastaa ihmisen rintasyövän käyttäytymistä, ja se leviää usein keuhkoihin ja muihin paikkoihin, kuten vatsakalvoon ja aivoihin. Nämä ominaisuudet tekevät EO771:stä arvokkaan mallin uusien syöpähoitojen tehokkuuden arvioimiseksi ja kasvaimen ja immuunijärjestelmän dynamiikan ymmärtämiseksi.

Kudos
Rintarauhanen
Sairaus
Pahanlaatuinen kasvain
Synonyymit
  • Eo771
  • E0771
  • EO 771

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
EO771 (Cytionin luettelonumero 305352)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_GR23

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
ERalpha-, ERbeta+, PR+ ja ErbB2+

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisätään elatusaineeseen 10 % FBS, 20 mM HEPES
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Ylläpidä viljelmät välillä 5–10 x 104 solua/cm2.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6