GIST-T1

קו התאים GIST-T1 הוא מודל מבוסס היטב לגידול סטרומלי במערכת העיכול האנושית (GIST), שמקורו בנגע פלאורלי גרורתי שנוצר כתוצאה מ-GIST ראשוני בקיבה אצל אישה יפנית בוגרת. ניתוחים אימונוהיסטוכימיים אישרו חיוביות חזקה ל-c-KIT (CD117) ו-CD34, שני סמנים מובהקים של GIST, בעוד שהקו היה שלילי לדסמין, S-100 ו-α-אקטין של שריר חלק, מה שמאשר את מקורו הלא-שרירי והלא-עצבי. מחקרים ציטוגנטיים חשפו קריוטיפ היפודיפלואידי עם מומים כרומוזומליים מורכבים, כולל כרומוזום טבעת ומספר טרנסלוקציות לא מאוזנות. הכלאות גנומיות השוואתיות (CGH) וניתוחי FISH הראו הגברות ברמה גבוהה באזורים 3q26.1-27, 5p12-15.1 ו-7q21.3-36, הקשורים לעתים קרובות להגברת אונקוגנים ב-GIST.

GIST-T1 נושא מחיקה רלוונטית קלינית של 57 נוקלאוטידים בתוך המסגרת באקסון 11 של גן *KIT* (V570-Y578), אחת המוטציות הנפוצות ביותר בחולי GIST ויעד קריטי של מעכבי טירוזין קינאז כגון אימטיניב. דבר זה הפך את GIST-T1 למודל חיוני לחקר אונקוגנזה מונעת KIT ותגובה טיפולית. בתרבית ארוכת טווח, תאי GIST-T1 מפגינים שגשוג יציב ושומרים על רגישות לאימטיניב, אלא אם נבחרו באופן ספציפי לעמידות. תתי-קווים עמידים נגזרים של GIST-T1 נוצרו למטרות מחקר ומפגינים מוטציות משניות ב-KIT (למשל, D820V או D820Y), מה שמאפשר לחקור מנגנוני עמידות ושינויים תעתיקיים אדפטיביים. מודלים עמידים אלה מפגינים שינויים בגנים הקשורים לניקוי רעלים, לוויסות מחזור התא ולהימנעות מאפופטוזיס.

GIST-T1 תרם גם לגילוי גורמים אונקוגניים חדשים ב-GIST, כולל גנים מותכים כגון EXOC2-AK7, שזוהו בתת-קווים עמידים לאימטיניב. מחקרים תפקודיים הראו כי גנים מותכים אלה משפרים את יכולות ההתפשטות והנדידה של תאי GIST ומגבירים את רגישותם לאימטיניב, מה שמצביע על כיוונים טיפוליים חדשים. נוכחותם של מגבירי-על הקשורים ל-GIST ורשתות גורמי שעתוק (למשל, HAND1 בהתקדמות גרורתית) מחזקת עוד יותר את התועלת של המודל בפענוח הארכיטקטורה האפיגנטית והטרנסקריפטומית של GIST. בסך הכל, GIST-T1 מספק מערכת איתנה, שאושרה גנטית ופנוטיפית, לחקר הביולוגיה, התגובה לתרופות ומנגנוני העמידות של גידולים סטרומליים במערכת העיכול.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו