GIST-T1

สายเซลล์ GIST-T1 เป็นแบบจำลองเนื้องอกสโตรมาของทางเดินอาหารในมนุษย์ (GIST) ที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวาง ซึ่งได้มาจากรอยโรคที่เยื่อหุ้มปอดซึ่งเกิดจากการแพร่กระจายของเนื้องอก GIST ที่กระเพาะอาหารในผู้ใหญ่หญิงชาวญี่ปุ่น การวิเคราะห์ทางอิมมูโนฮิสโตเคมียืนยันผลบวกอย่างชัดเจนต่อ c-KIT (CD117) และ CD34 ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้หลักสองชนิดของ GIST ในขณะที่สายพันธุ์นี้ให้ผลลบต่อ desmin, S-100 และ α-smooth muscle actin ยืนยันว่าไม่ใช่มัสเซิลและไม่ใช่นิวรอล การศึกษาทางไซโตจีเนติกพบว่ามีโครโมโซมชุดพื้นฐานที่ต่ำกว่าปกติ (hypodiploid) พร้อมความผิดปกติของโครโมโซมที่ซับซ้อน รวมถึงโครโมโซมวงแหวนและการแลกเปลี่ยนชิ้นส่วนที่ไม่สมดุลหลายตำแหน่ง การวิเคราะห์การไฮบริดแบบเปรียบเทียบทางจีโนม (CGH) และการวิเคราะห์ FISH แสดงให้เห็นการขยายระดับสูงที่บริเวณ 3q26.1-27, 5p12-15.1 และ 7q21.3-36 ซึ่งมักเกี่ยวข้องกับการขยายยีนก่อมะเร็งใน GIST

GIST-T1 มีลักษณะการกลายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องทางคลินิก คือการลบอินเฟรม 57 นิวคลีโอไทด์ในเอ็กซอน 11 ของยีน *KIT* (V570-Y578) ซึ่งเป็นหนึ่งในรูปแบบการกลายพันธุ์ที่พบได้บ่อยที่สุดในผู้ป่วย GIST และเป็นเป้าหมายสำคัญของการยับยั้งไทโรซีนไคเนส เช่น อิมานิทิบ การกลายพันธุ์นี้ทำให้ GIST-T1 เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาการเกิดมะเร็งที่ขับเคลื่อนโดย KIT และการตอบสนองต่อการรักษา ในการเพาะเลี้ยงระยะยาว เซลล์ GIST-T1 แสดงการเพิ่มจำนวนที่คงที่และยังคงไวต่ออิมาทินิบ เว้นแต่จะถูกคัดเลือกให้มีความต้านทานโดยเฉพาะ สายพันธุ์ย่อยที่ต้านทานอนุพันธ์ของ GIST-T1 ได้ถูกสร้างขึ้นเพื่อวัตถุประสงค์ในการวิจัยและแสดงการกลายพันธุ์ของ KIT ทุติยภูมิ (เช่น D820V หรือ D820Y) ซึ่งช่วยให้สามารถศึกษาวิถีการต้านทานและเปลี่ยนแปลงการถอดรหัสแบบปรับตัวได้ โมเดลที่ต้านทานเหล่านี้แสดงให้เห็นการเปลี่ยนแปลงในยีนที่เกี่ยวข้องกับการขจัดสารพิษ การควบคุมวัฏจักรเซลล์ และการหลบเลี่ยงการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส

GIST-T1 ยังมีส่วนช่วยในการค้นพบตัวขับเคลื่อนมะเร็งชนิดใหม่ใน GIST รวมถึงยีนฟิวชั่น เช่น EXOC2-AK7 ซึ่งถูกระบุในสายพันธุ์ที่ดื้อต่อยาอิมาทินิบ การศึกษาเชิงหน้าที่แสดงให้เห็นว่ายีนฟิวชั่นเหล่านี้เพิ่มความสามารถในการแบ่งตัวและการเคลื่อนที่ของเซลล์ GIST และทำให้เซลล์เหล่านี้ไวต่อยาอิมาทินิบมากขึ้น ซึ่งชี้ให้เห็นถึงแนวทางการรักษาใหม่ การมีอยู่ของ super-enhancers ที่เกี่ยวข้องกับ GIST และเครือข่ายของปัจจัยการถอดรหัส (เช่น HAND1 ในการแพร่กระจาย) ยิ่งเสริมความสำคัญของโมเดลนี้ในการถอดรหัสสถาปัตยกรรมทางอีพิเจเนติกส์และการถอดรหัสของ GIST โดยรวมแล้ว GIST-T1 มอบระบบที่แข็งแกร่งและได้รับการยืนยันทั้งทางพันธุกรรมและทางฟีโนไทป์สำหรับการศึกษาชีววิทยา การตอบสนองต่อยา และกลไกการดื้อยาของเนื้องอกในเนื้อเยื่อเกี่ยวพันของระบบทางเดินอาหาร

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.