GIST-T1

Клітинна лінія GIST-T1 — це добре відома модель пухлини шлунково-кишкової стромальної тканини (GIST) людини, отримана з метастатичного ураження плеври, що виникло як ускладнення первинної GIST шлунка у дорослої японської жінки. Імуногістохімічні аналізи підтвердили сильну позитивність за c-KIT (CD117) та CD34, двома характерними маркерами GIST, тоді як лінія була негативною за десміном, S-100 та α-актином гладких м’язів, що підтвердило її нем’язове та ненейронне походження. Цитогенетичні дослідження виявили гіподиплоїдний каріотип зі складними хромосомними аномаліями, включаючи кільцеву хромосому та кілька незбалансованих транслокацій. Аналізи порівняльної геномної гібридизації (CGH) та FISH показали високий рівень ампліфікації в ділянках 3q26.1-27, 5p12-15.1 та 7q21.3-36, що часто асоціюються з ампліфікацією онкогенів у GIST.

GIST-T1 містить клінічно значущу 57-нуклеотидну делецію в рамках екзону 11 гена *KIT* (V570-Y578), одну з найпоширеніших мутацій у пацієнтів з GIST та критичну мішень інгібіторів тирозинкінази, таких як іматиніб. Це зробило GIST-T1 важливою моделлю для вивчення онкогенезу, опосередкованого KIT, та терапевтичної відповіді. У довготривалій культурі клітини GIST-T1 демонструють стабільну проліферацію та зберігають чутливість до іматинібу, якщо їх спеціально не селекціонувати на резистентність. Для дослідницьких цілей були створені похідні резистентні сублінії GIST-T1, які демонструють вторинні мутації KIT (наприклад, D820V або D820Y), що дозволяє вивчати механізми резистентності та адаптивні транскрипційні зміни. Ці резистентні моделі демонструють зміни в генах, пов’язаних з детоксикацією, регуляцією клітинного циклу та уникненням апоптозу.

GIST-T1 також сприяв відкриттю нових онкогенних драйверів у GIST, включаючи гени злиття, такі як EXOC2-AK7, ідентифіковані в резистентних до іматинібу сублініях. Функціональні дослідження продемонстрували, що ці гени злиття посилюють проліферативні та міграційні можливості клітин GIST і сенсибілізують їх до іматинібу, вказуючи на нові терапевтичні шляхи. Наявність супер-енхансерів, пов’язаних із GIST, та мереж транскрипційних факторів (наприклад, HAND1 у прогресуванні метастазування) ще більше підкреслює корисність моделі у розшифруванні епігенетичної та транскрипційної архітектури GIST. Загалом, GIST-T1 забезпечує надійну, генетично та фенотипічно валідовану систему для вивчення біології, реакції на ліки та механізмів резистентності шлунково-кишкових стромальних пухлин.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>