GIST-T1

GIST-T1 ląstelių linija yra gerai žinomas žmogaus virškinimo trakto stromos naviko (GIST) modelis, gautas iš metastazės pleuros pažeidimo, išsivysčiusio kaip antrinis navikas po pirminio skrandžio GIST suaugusiai japonų moteriai. Imunohistocheminiai tyrimai patvirtino stiprų c-KIT (CD117) ir CD34, dviejų pagrindinių GIST žymenų, teigiamumą, o linija buvo neigiama desminui, S-100 ir α-lygiųjų raumenų aktinui, patvirtindama jos ne raumeninę ir ne nervinę kilmę. Citogenetiniai tyrimai atskleidė hipodiploidinį kariotipą su sudėtingomis chromosomų anomalijomis, įskaitant žiedinę chromosomą ir keletą nesubalansuotų translokacijų. Lyginamoji genominė hibridizacija (CGH) ir FISH tyrimai parodė aukšto lygio amplifikacijas 3q26.1–27, 5p12–15.1 ir 7q21.3–36 regionuose, dažnai siejamose su onkogenų amplifikacija GIST.

GIST-T1 turi klinikinę reikšmę turinčią 57 nukleotidų in-frame deleciją *KIT* geno 11-ajame eksone (V570-Y578), kuri yra viena iš dažniausių mutacijų GIST pacientams ir kritinis tirozino kinazės inhibitorių, tokių kaip imatinibas, taikinys. Dėl to GIST-T1 tapo esminiu modeliu KIT sukeltos onkogenezės ir terapinio atsako tyrimams. Ilgalaikėje kultūroje GIST-T1 ląstelės rodo stabilią proliferaciją ir išlaiko jautrumą imatinibui, nebent būtų specialiai atrinktos dėl atsparumo. Mokslinių tyrimų tikslais buvo sukurtos GIST-T1 atsparios atšakos, pasižyminčios antrinėmis KIT mutacijomis (pvz., D820V arba D820Y), leidžiančiomis tirti atsparumo mechanizmus ir adaptyvius transkripcijos pokyčius. Šie atsparūs modeliai rodo pokyčius genuose, susijusiuose su detoksikacija, ląstelių ciklo reguliavimu ir apoptozės išvengimu.

GIST-T1 taip pat prisidėjo prie naujų onkogeninių veiksnių atradimo GIST, įskaitant jungimo genus, pvz., EXOC2-AK7, identifikuotus imatinibui atspariose sublinijose. Funkciniai tyrimai parodė, kad šie jungimo genai stiprina GIST ląstelių proliferacijos ir migracijos gebėjimus bei padidina jų jautrumą imatinibui, nurodydami naujas terapines galimybes. GIST susijusių super-stipriklių ir transkripcijos faktorių tinklų (pvz., HAND1 metastazės progresijoje) buvimas dar labiau sustiprina modelio naudingumą iššifruojant GIST epigenetinę ir transkripcinę struktūrą. Apibendrinant, GIST-T1 suteikia patikimą, genetiškai ir fenotipiškai patvirtintą sistemą virškinimo trakto stromos navikų biologijai, reakcijai į vaistus ir atsparumo mechanizmams tirti.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime