GIST-T1

Bunka GIST-T1 je osvedčený model ľudského gastrointestinálneho stromálneho nádoru (GIST), ktorý bol získaný z metastatického lézie pohrudnice, ktorá vznikla ako následok primárneho GIST žalúdka u dospelá japonskej ženy. Imunohistochemické analýzy potvrdili silnú pozitivitu na c-KIT (CD117) a CD34, dva charakteristické markery GIST, zatiaľ čo línia bola negatívna na desmín, S-100 a α-aktín hladkého svalstva, čo potvrdilo jej nemuskulárny a ne-neurálny pôvod. Cytogenetické štúdie odhalili hypodiploidný karyotyp so zložitými chromozómovými abnormalitami, vrátane prstencového chromozómu a niekoľkých nevyvážených translokácií. Analýzy komparatívnej genómovej hybridizácie (CGH) a FISH ukázali amplifikácie na vysokej úrovni v oblastiach 3q26.1-27, 5p12-15.1 a 7q21.3-36, ktoré sú často spojené s amplifikáciou onkogénov v GIST.

GIST-T1 obsahuje klinicky relevantnú 57-nukleotidovú in-frame deléciu v exóne 11 génu *KIT* (V570-Y578), jednu z najčastejších mutácií u pacientov s GIST a kritický cieľ inhibítorov tyrozínkinázy, ako je imatinib. Vďaka tomu sa GIST-T1 stal základným modelom pre štúdium onkogenézy riadenej KIT a terapeutickej odpovede. Pri dlhodobej kultivácii vykazujú bunky GIST-T1 stabilnú proliferáciu a zachovávajú citlivosť na imatinib, pokiaľ nie sú špecificky selektované na rezistenciu. Na výskumné účely boli vytvorené derivované rezistentné sublínie GIST-T1, ktoré vykazujú sekundárne mutácie KIT (napr. D820V alebo D820Y), čo umožňuje štúdium mechanizmov rezistencie a adaptívnych transkripčných zmien. Tieto rezistentné modely vykazujú zmeny v génoch súvisiacich s detoxikáciou, reguláciou bunkového cyklu a vyhýbaním sa apoptóze.

GIST-T1 tiež prispel k objaveniu nových onkogénnych faktorov v GIST, vrátane fúznych génov, ako je EXOC2-AK7, identifikovaných v sublíniách rezistentných na imatinib. Funkčné štúdie preukázali, že tieto fúzne gény zvyšujú proliferačné a migračné schopnosti buniek GIST a zvyšujú ich citlivosť na imatinib, čo poukazuje na nové terapeutické možnosti. Prítomnosť super-enhancerov asociovaných s GIST a sietí transkripčných faktorov (napr. HAND1 v metastatickom progrese) ďalej posilňuje užitočnosť modelu pri dešifrovaní epigenetickej a transkripčnej architektúry GIST. Celkovo GIST-T1 poskytuje robustný, geneticky a fenotypovo validovaný systém na štúdium biológie, reakcie na lieky a mechanizmov rezistencie gastrointestinálnych stromálnych nádorov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke