GIST-T1

Die Zelllinie GIST-T1 ist ein etabliertes Modell für humane gastrointestinale Stromatumoren (GIST), das aus einer metastasierten Pleuraläsion abgeleitet wurde, die sekundär zu einem primären Magen-GIST bei einer erwachsenen japanischen Frau auftrat. Immunhistochemische Analysen bestätigten eine starke Positivität für c-KIT (CD117) und CD34, zwei charakteristische Marker für GIST, während die Linie negativ für Desmin, S-100 und α-glatte Muskelaktin war, was ihren nicht-muskulären und nicht-neuralen Ursprung bestätigte. Zytogenetische Untersuchungen ergaben einen hypodiploiden Karyotyp mit komplexen chromosomalen Anomalien, darunter ein Ringchromosom und mehrere unausgewogene Translokationen. Analysen mittels vergleichender genomischer Hybridisierung (CGH) und FISH zeigten hochgradige Amplifikationen in den Regionen 3q26.1–27, 5p12–15.1 und 7q21.3–36, die häufig mit Onkogenamplifikationen bei GIST assoziiert sind.

GIST-T1 weist eine klinisch relevante 57-Nukleotid-In-Frame-Deletion im Exon 11 des *KIT*-Gens (V570-Y578) auf, eine der häufigsten Mutationen bei GIST-Patienten und ein kritisches Ziel für Tyrosinkinase-Inhibitoren wie Imatinib. Dies hat GIST-T1 zu einem unverzichtbaren Modell für die Untersuchung der KIT-gesteuerten Onkogenese und des therapeutischen Ansprechens gemacht. In Langzeitkulturen zeigen GIST-T1-Zellen eine stabile Proliferation und behalten ihre Empfindlichkeit gegenüber Imatinib bei, sofern sie nicht gezielt auf Resistenz selektiert werden. Für Forschungszwecke wurden resistente Sublinien von GIST-T1 erzeugt, die sekundäre KIT-Mutationen (z. B. D820V oder D820Y) aufweisen, was die Untersuchung von Resistenzmechanismen und adaptiven Transkriptionsveränderungen ermöglicht. Diese resistenten Modelle zeigen Veränderungen in Genen, die mit Entgiftung, Zellzyklusregulation und Apoptosevermeidung in Zusammenhang stehen.

GIST-T1 hat auch zur Entdeckung neuartiger onkogener Treiber bei GIST beigetragen, darunter Fusionsgene wie EXOC2-AK7, die in Imatinib-resistenten Sublinien identifiziert wurden. Funktionelle Studien zeigten, dass diese Fusionsgene die Proliferations- und Migrationsfähigkeit von GIST-Zellen verstärken und sie gegenüber Imatinib sensibilisieren, was auf neue therapeutische Ansätze hindeutet. Das Vorhandensein von GIST-assoziierten Super-Enhancern und Transkriptionsfaktornetzwerken (z. B. HAND1 bei der Metastasierung) untermauert die Nützlichkeit des Modells für die Entschlüsselung der epigenetischen und transkriptionellen Architektur von GIST zusätzlich. Insgesamt bietet GIST-T1 ein robustes, genetisch und phänotypisch validiertes System zur Untersuchung der Biologie, des Ansprechverhaltens auf Medikamente und der Resistenzmechanismen von gastrointestinalen Stromatumoren.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung