GIST-T1

سلسلة الخلايا GIST-T1 هي نموذج راسخ لورم اللحمة المعوية البشرية (GIST) مستمد من آفة غشائية رئوية منتشرة ناتجة عن ورم GIST معدي أولي لدى امرأة يابانية بالغة. أكدت التحليلات المناعية النسيجية إيجابية قوية لـ c-KIT (CD117) و CD34، وهما علامتان مميزتان لـ GIST، في حين كانت السلالة سلبية بالنسبة للديسمين و S-100 وأكتين العضلات الملساء α، مما يؤكد أصلها غير العضلي وغير العصبي. كشفت الدراسات الخلوية الوراثية عن نمط كروموسومي ناقص الصبغيات مع تشوهات كروموسومية معقدة، بما في ذلك كروموسوم حلقي وعدة انتقالات غير متوازنة. أظهرت تحليلات التهجين الجيني المقارن (CGH) و FISH تضخمات عالية المستوى في المناطق 3q26.1-27 و 5p12-15.1 و 7q21.3-36، والتي غالبًا ما ترتبط بتضخم الجينات المسرطنة في GIST.

يحتوي GIST-T1 على حذف داخل الإطار ذي صلة سريرية مكون من 57 نوكليوتيد في الإكسون 11 من جين *KIT* (V570-Y578)، وهو أحد أكثر الطفرات شيوعًا لدى مرضى GIST وهدف حاسم لمثبطات كيناز التيروزين مثل إيماتينيب. وقد جعل هذا من GIST-T1 نموذجًا أساسيًا لدراسة التسرطن المدفوع بـ KIT والاستجابة العلاجية. في الاستزراع طويل الأمد، تُظهر خلايا GIST-T1 تكاثرًا مستقرًا وتحتفظ بحساسيتها تجاه إيماتينيب ما لم يتم اختيارها خصيصًا لتكون مقاومة. تم إنتاج سلالات فرعية مقاومة مشتقة من GIST-T1 لأغراض البحث وتظهر طفرات ثانوية في KIT (على سبيل المثال، D820V أو D820Y)، مما يتيح دراسة آليات المقاومة والتغيرات النسخية التكيفية. تظهر هذه النماذج المقاومة تغيرات في الجينات المرتبطة بإزالة السموم وتنظيم دورة الخلية وتجنب موت الخلايا المبرمج.

كما ساهمت GIST-T1 في اكتشاف محركات سرطانية جديدة في GIST، بما في ذلك جينات الاندماج مثل EXOC2-AK7، التي تم تحديدها في السلالات الفرعية المقاومة للإيماتينيب. أظهرت الدراسات الوظيفية أن جينات الاندماج هذه تعزز قدرات تكاثر وهجرة خلايا GIST وتجعلها حساسة للإيماتينيب، مما يشير إلى مسارات علاجية جديدة. إن وجود المعززات الفائقة المرتبطة بـ GIST وشبكات عوامل النسخ (مثل HAND1 في تطور النقائل) يعزز بشكل أكبر فائدة النموذج في فك رموز البنية اللاجينية والنسخية لـ GIST. وبشكل عام، يوفر GIST-T1 نظامًا قويًا ومثبتًا وراثيًا وظهاريًا لدراسة بيولوجيا أورام اللحمة المعوية واستجابتها للأدوية وآليات مقاومتها.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان