GIST-T1

GIST-T1細胞株は、日本人成人女性の原発性胃GISTに続発した転移性胸膜病変から樹立された、確立されたヒト消化管間質腫瘍（GIST）モデルである。 免疫組織化学的解析により、GISTの2つの特徴的なマーカーであるc-KIT（CD117）およびCD34に対する強い陽性が確認された一方、デスミン、S-100、α-平滑筋アクチンに対しては陰性であり、その非筋性および非神経性の起源が確認された。 細胞遺伝学的検査では、リング染色体やいくつかの不均衡転座を含む複雑な染色体異常を伴う低二倍体核型が認められた。 比較ゲノムハイブリダイゼーション（CGH）およびFISH解析により、GISTにおける癌遺伝子増幅と関連することが多い3q26.1-27、5p12-15.1、および7q21.3-36領域で高レベルの増幅が認められた。

GIST-T1 は、*KIT* 遺伝子のエクソン 11 に臨床的に関連する 57 ヌクレオチドのフレーム内欠失（V570-Y578）を有しており、これは GIST 患者において最も一般的な変異の一つであり、イマチニブなどのチロシンキナーゼ阻害剤の重要な標的となっています。このため、GIST-T1 は KIT による発癌および治療反応を研究するための不可欠なモデルとなっています。 長期培養において、GIST-T1細胞は安定した増殖を示し、特に耐性が選択されない限り、イマチニブに対する感受性を維持する。 研究目的でGIST-T1の耐性サブラインが作成されており、これらは二次的なKIT変異（例：D820VまたはD820Y）を示し、耐性メカニズムや適応的な転写変化の研究を可能にしている。これらの耐性モデルでは、解毒、細胞周期調節、アポトーシス回避に関連する遺伝子に変異が認められる。

GIST-T1はまた、イマチニブ耐性亜株で同定されたEXOC2-AK7などの融合遺伝子を含め、GISTにおける新規発癌ドライバー遺伝子の発見にも寄与している。機能解析により、これらの融合遺伝子がGIST細胞の増殖能および遊走能を増強し、イマチニブに対する感受性を高めることが実証され、新たな治療法の道筋を示唆している。 GISTに関連するスーパーエンハンサーや転写因子ネットワーク（例：転移進行におけるHAND1）の存在は、GISTのエピジェネティックおよび転写の構造を解明する上で、本モデルの有用性をさらに裏付けています。総じて、GIST-T1は、消化管間質腫瘍の生物学、薬剤反応、および耐性メカニズムを研究するための、遺伝学的および表現型的に検証された堅牢なシステムを提供しています。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。