Skip to content
NRK-52E
Tissue
כליה
Synonyms
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

Documents

NRK-52E

Cell line · Product number 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים NRK-52E, שמקורו בכליה תקינה של חולדה, הוא קו תאים אפיתלואידי המייצג תאי אפיתל צינורי פרוקסימלי. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקר נפרולוגי, במיוחד במחקרים על פיזיולוגיה, טוקסיקולוגיה ופתופיזיולוגיה של הכליה. תאי NRK-52E מציגים מורפולוגיה אפיתלואידית אופיינית עם חיבורים הדוקים, מה שהופך אותם מתאימים למודלים במבחנה של תפקוד צינורי הכליה ושלמות המחסום.

תאי NRK-52E שימשו ככלי חשוב במחקר מנגנונים של אפופטוזיס, תיקון תאי והובלת יונים. לדוגמה, קו התאים שימש לחקר ההשפעות של חומצה אוקדאית, מעכב פוספטאז חלבוני, וחשף את תפקידה בהשראת מסלולי אפופטוזיס הכוללים עיבוי כרומטין, זרימת סידן ושינויים במיטוכונדריה. מחקרים אלה סיפקו תובנות על ויסות מנגנוני מוות והישרדות של תאי כליה במהלך פגיעה או מחלה.

יתר על כן, תאי NRK-52E שימשו להערכת הובלת יונים אפיתלית כלייתית ותכונות מחסום בתנאי ניסוי שונים, כגון מערכות מיקרו-פלואידיות המדמות תנאי זרימה פיזיולוגיים. זה כולל מחקר על ספיגה חוזרת של נתרן כלוריד והתנגדות חשמלית טרנסאפיתלית, החיוניים להבנת איזון אלקטרוליטים ומים בפיזיולוגיה הכלייתית. מאפיינים אלה הופכים את NRK-52E למודל חזק לחקר הביולוגיה של תאי הצינוריות הכלייתיות והתערבויות טיפוליות במחלות כליה.

Tissue
כליה
Synonyms
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
NRK-52E (מספר קטלוג Cytion 305196)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
אוסבורן-מנדל