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NRK-52E
Tecido
Rim
Sinónimos
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

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NRK-52E

Cell line · Número do produto 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular NRK-52E, derivada do rim normal de um rato, é uma linha celular epitelioide que representa células epiteliais tubulares proximais. Esta linha celular é amplamente utilizada na investigação nefrológica, especialmente para estudos sobre fisiologia, toxicologia e fisiopatologia renais. As células NRK-52E apresentam uma morfologia epitelial caraterística com junções estreitas, o que as torna adequadas para a modelação in vitro da função tubular renal e da integridade da barreira.

As células NRK-52E têm sido fundamentais no estudo dos mecanismos de apoptose, reparação celular e transporte de iões. Por exemplo, a linha celular foi utilizada para investigar os efeitos do ácido ocadaico, um inibidor da proteína fosfatase, revelando o seu papel na indução de vias apoptóticas que envolvem a condensação da cromatina, o influxo de cálcio e as alterações mitocondriais. Estes estudos forneceram informações sobre a regulação dos mecanismos de morte e sobrevivência das células renais durante lesões ou doenças.

Além disso, as células NRK-52E têm sido utilizadas para avaliar o transporte de iões epiteliais renais e as propriedades de barreira em várias configurações experimentais, tais como sistemas microfluídicos que imitam as condições de fluxo fisiológico. Isto inclui investigação sobre a reabsorção de cloreto de sódio e a resistência eléctrica transepitelial, que são fundamentais para compreender o equilíbrio de electrólitos e água na fisiologia renal. Estas caraterísticas fazem do NRK-52E um modelo robusto para explorar a biologia das células tubulares renais e as intervenções terapêuticas nas doenças renais.

Tecido
Rim
Sinónimos
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
NRK-52E (número de catálogo da Cytion 305196)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
Osborne-Mendel