Prejsť na obsah
NRK-52E
Tkanivo
Obličky
Synonymá
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

Dokumenty

NRK-52E

Cell line · Číslo výrobku 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia NRK-52E odvodená z normálnej obličky potkana je epiteloidná bunková línia reprezentujúca bunky proximálneho tubulárneho epitelu. Táto bunková línia sa široko používa v nefrologickom výskume, najmä na štúdie fyziológie, toxikológie a patofyziológie obličiek. Bunky NRK-52E vykazujú charakteristickú epitelovú morfológiu s tesnými spojmi, vďaka čomu sú vhodné na in vitro modelovanie renálnej tubulárnej funkcie a integrity bariéry.

Bunky NRK-52E boli nápomocné pri štúdiu mechanizmov apoptózy, bunkovej opravy a transportu iónov. Táto bunková línia sa napríklad použila na skúmanie účinkov kyseliny okadaikovej, inhibítora proteínovej fosfatázy, pričom sa odhalila jej úloha pri indukcii apoptotických dráh zahŕňajúcich kondenzáciu chromatínu, prílev vápnika a mitochondriálne zmeny. Tieto štúdie umožnili nahliadnuť do regulácie mechanizmov smrti a prežívania obličkových buniek počas poškodenia alebo ochorenia.

Okrem toho sa bunky NRK-52E použili na hodnotenie transportu iónov a bariérových vlastností renálneho epitelu v rôznych experimentálnych usporiadaniach, ako sú mikrofluidické systémy, ktoré napodobňujú fyziologické podmienky prietoku. To zahŕňa výskum reabsorpcie chloridu sodného a transepiteliálneho elektrického odporu, ktoré sú rozhodujúce pre pochopenie rovnováhy elektrolytov a vody vo fyziológii obličiek. Vďaka týmto vlastnostiam je NRK-52E spoľahlivým modelom na skúmanie biológie obličkových tubulárnych buniek a terapeutických zásahov pri ochoreniach obličiek.

Tkanivo
Obličky
Synonymá
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
NRK-52E (katalógové číslo Cytion 305196)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
Osborne-Mendel