Siirry sisältöön
NRK-52E
Kudos
Munuaiset
Synonyymit
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

Asiakirjat

NRK-52E

Cell line · Tuotenumero 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NRK-52E-solulinja, joka on peräisin rotan normaalista munuaisesta, on epitelioidinen solulinja, joka edustaa proksimaalisia tubulaarisia epiteelisoluja. Tätä solulinjaa käytetään laajalti nefrologisessa tutkimuksessa, erityisesti munuaisten fysiologiaa, toksikologiaa ja patofysiologiaa koskevissa tutkimuksissa. NRK-52E-soluilla on tyypillinen epiteelimorfologia, jossa on tiukkoja liitoksia, minkä vuoksi ne soveltuvat munuaistubulusten toiminnan ja esteen eheyden in vitro -mallinnukseen.

NRK-52E-solut ovat olleet tärkeitä apoptoosin, solujen korjautumisen ja ionien kuljetuksen mekanismien tutkimisessa. Solulinjaa on esimerkiksi käytetty proteiinifosfataasin estäjän okadahapon vaikutusten tutkimiseen, ja sen rooli apoptoottisten reittien indusoimisessa, johon liittyy kromatiinin tiivistymistä, kalsiumin tuloa ja mitokondriomuutoksia, on paljastunut. Nämä tutkimukset ovat antaneet tietoa munuaissolujen kuoleman ja eloonjäämismekanismien säätelystä vamman tai sairauden aikana.

Lisäksi NRK-52E-soluja on käytetty munuaisten epiteelin ionikuljetus- ja esteominaisuuksien arviointiin erilaisissa koejärjestelyissä, kuten fysiologisia virtausolosuhteita jäljittelevissä mikrofluidisissa järjestelmissä. Tähän sisältyy natriumkloridin takaisinimeytymisen ja transepiteliaalisen sähköisen resistanssin tutkimus, jotka ovat ratkaisevia munuaisten fysiologian elektrolyytti- ja vesitasapainon ymmärtämisen kannalta. Nämä ominaisuudet tekevät NRK-52E:stä vankan mallin munuaistubulussolujen biologian ja munuaissairauksien terapeuttisten toimenpiteiden tutkimiseen.

Kudos
Munuaiset
Synonyymit
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
NRK-52E (Cytionin tuotenumero 305196)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Osborne-Mendel