Pereiti prie turinio
NRK-52E
Audinys
Inkstai
Sinonimai
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

Dokumentai

NRK-52E

Cell line · Prekės numeris 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NRK-52E ląstelių linija, gauta iš normalaus žiurkės inksto, yra epitelioidinių ląstelių linija, atstovaujanti proksimalinio kanalėlio epitelio ląstelėms. Ši ląstelių linija plačiai naudojama nefrologiniuose tyrimuose, ypač inkstų fiziologijos, toksikologijos ir patofiziologijos tyrimams. NRK-52E ląstelės pasižymi būdinga epitelio morfologija su sandariomis jungtimis, todėl jos tinka in vitro modeliuoti inkstų kanalėlių funkciją ir barjero vientisumą.

NRK-52E ląstelės buvo naudingos tiriant apoptozės, ląstelių remonto ir jonų pernašos mechanizmus. Pavyzdžiui, ši ląstelių linija buvo naudojama tiriant baltymų fosfatazės inhibitoriaus okadaino rūgšties poveikį, atskleidžiant jos vaidmenį indukuojant apoptozės kelius, apimančius chromatino kondensaciją, kalcio antplūdį ir mitochondrijų pokyčius. Šie tyrimai leido įžvelgti inkstų ląstelių žūties ir išgyvenimo mechanizmų reguliavimą sužalojimo ar ligos metu.

Be to, NRK-52E ląstelės buvo naudojamos inkstų epitelio jonų pernašai ir barjerinėms savybėms vertinti įvairiose eksperimentinėse sistemose, pavyzdžiui, mikrofluidinėse sistemose, imituojančiose fiziologinio srauto sąlygas. Tai apima natrio chlorido reabsorbcijos ir transepitelio elektrinio pasipriešinimo tyrimus, kurie yra labai svarbūs norint suprasti elektrolitų ir vandens pusiausvyrą inkstų fiziologijoje. Dėl šių savybių NRK-52E yra patikimas modelis inkstų kanalėlių ląstelių biologijai ir inkstų ligų terapinėms intervencijoms tirti.

Audinys
Inkstai
Sinonimai
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
NRK-52E (Cytion katalogo numeris 305196)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
Osborne-Mendel