الانتقال إلى المحتوى
NRK-52E
الأنسجة
الكلى
المرادفات
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

المستندات

NRK-52E

Cell line · رقم المنتج 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي NRK-52E، المشتق من الكلية الطبيعية للفئران، هو خط خلوي ظهاري يمثل الخلايا الظهارية الأنبوبية القريبة. يُستخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في أبحاث أمراض الكلى، خاصةً في الدراسات المتعلقة بفيزيولوجيا الكلى وعلم السموم والفيزيولوجيا المرضية. تُظهر خلايا NRK-52E مورفولوجيا طلائية مميزة مع وصلات محكمة، مما يجعلها مناسبة للنمذجة المختبرية لوظيفة الأنبوبة الكلوية وسلامة الحاجز الكلوي.

كان لخلايا NRK-52E دور فعال في دراسة آليات موت الخلايا المبرمج والإصلاح الخلوي ونقل الأيونات. على سبيل المثال، تم استخدام هذا الخط الخلوي لدراسة تأثيرات حمض الأوكادايك، وهو مثبط فوسفاتيز البروتين، وكشف عن دوره في تحفيز مسارات موت الخلايا المبرمج التي تتضمن تكثيف الكروماتين وتدفق الكالسيوم وتغيرات الميتوكوندريا. قدمت هذه الدراسات رؤى حول تنظيم موت الخلايا الكلوية وآليات البقاء على قيد الحياة أثناء الإصابة أو المرض.

وعلاوة على ذلك، استُخدمت خلايا NRK-52E لتقييم نقل الأيونات الظهارية الكلوية وخصائص الحاجز في ظل إعدادات تجريبية مختلفة، مثل أنظمة الموائع الدقيقة التي تحاكي ظروف التدفق الفسيولوجي. ويشمل ذلك أبحاثاً حول إعادة امتصاص كلوريد الصوديوم والمقاومة الكهربائية عبر الظهارة الكلوية، والتي تعتبر حاسمة لفهم توازن الكهارل والماء في فسيولوجيا الكلى. هذه الخصائص تجعل من NRK-52E نموذجاً قوياً لاستكشاف بيولوجيا الخلايا الأنبوبية الكلوية والتدخلات العلاجية في أمراض الكلى.

الأنسجة
الكلى
المرادفات
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02التصنيف

كائن حي
الجرذ
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
NRK-52E (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305196)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10116
سيلوصور
CVCL_0468

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
أوزبورن-مندل