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NRK-52E
Tessuto
Rene
Sinonimi
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

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NRK-52E

Cell line · Codice prodotto 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare NRK-52E, derivata dal rene normale di un ratto, è una linea cellulare epitelioide che rappresenta le cellule epiteliali tubulari prossimali. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca nefrologica, soprattutto per studi sulla fisiologia, la tossicologia e la fisiopatologia renale. Le cellule NRK-52E mostrano una caratteristica morfologia epiteliale con giunzioni strette, che le rende adatte alla modellazione in vitro della funzione tubulare renale e dell'integrità della barriera.

Le cellule NRK-52E sono state fondamentali per lo studio dei meccanismi di apoptosi, riparazione cellulare e trasporto ionico. Ad esempio, questa linea cellulare è stata utilizzata per studiare gli effetti dell'acido okadaico, un inibitore della fosfatasi proteica, rivelando il suo ruolo nell'indurre percorsi apoptotici che coinvolgono la condensazione della cromatina, l'afflusso di calcio e le alterazioni mitocondriali. Questi studi hanno fornito indicazioni sulla regolazione dei meccanismi di morte e sopravvivenza delle cellule renali durante le lesioni o le malattie.

Inoltre, le cellule NRK-52E sono state utilizzate per valutare le proprietà di trasporto ionico e di barriera dell'epitelio renale in varie configurazioni sperimentali, come i sistemi microfluidici che imitano le condizioni di flusso fisiologico. Ciò include ricerche sul riassorbimento del cloruro di sodio e sulla resistenza elettrica transepiteliale, che sono fondamentali per comprendere l'equilibrio elettrolitico e idrico nella fisiologia renale. Queste caratteristiche rendono NRK-52E un modello robusto per esplorare la biologia delle cellule tubulari renali e gli interventi terapeutici nelle malattie renali.

Tessuto
Rene
Sinonimi
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Classificazione

Organismo
Ratto
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
NRK-52E (numero di catalogo Cytion 305196)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Osborne-Mendel