Przejdź do treści
NRK-52E
Chusteczka
Nerka
Synonimy
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

Dokumenty

NRK-52E

Cell line · Numer produktu 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NRK-52E, pochodząca z prawidłowej nerki szczura, jest epitelioidną linią komórkową reprezentującą komórki nabłonka kanalików proksymalnych. Ta linia komórkowa jest szeroko stosowana w badaniach nefrologicznych, zwłaszcza w badaniach nad fizjologią, toksykologią i patofizjologią nerek. Komórki NRK-52E wykazują charakterystyczną morfologię nabłonka z połączeniami ścisłymi, dzięki czemu nadają się do modelowania in vitro funkcji kanalików nerkowych i integralności bariery.

Komórki NRK-52E odegrały kluczową rolę w badaniu mechanizmów apoptozy, naprawy komórkowej i transportu jonów. Na przykład linia komórkowa została wykorzystana do zbadania wpływu kwasu okadaikowego, inhibitora fosfatazy białkowej, ujawniając jego rolę w indukowaniu szlaków apoptotycznych obejmujących kondensację chromatyny, napływ wapnia i zmiany mitochondrialne. Badania te zapewniły wgląd w regulację mechanizmów śmierci i przeżycia komórek nerkowych podczas urazu lub choroby.

Ponadto, komórki NRK-52E zostały wykorzystane do oceny transportu jonów przez nabłonek nerkowy i właściwości barierowych w różnych konfiguracjach eksperymentalnych, takich jak systemy mikroprzepływowe, które naśladują fizjologiczne warunki przepływu. Obejmuje to badania nad reabsorpcją chlorku sodu i przezbłonowym oporem elektrycznym, które mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia równowagi elektrolitowej i wodnej w fizjologii nerek. Te cechy sprawiają, że NRK-52E jest solidnym modelem do badania biologii komórek kanalików nerkowych i interwencji terapeutycznych w chorobach nerek.

Chusteczka
Nerka
Synonimy
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
NRK-52E (numer katalogowy Cytion 305196)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
Osborne-Mendel