
- Tissue
- Rim
- Synonyms
- NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52
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NRK-52E
Cell line · Product number 305196
The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...
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01General information
- Description
A linhagem celular NRK-52E, derivada do rim normal de um rato, é uma linhagem de células epitelioides que representa as células epiteliais do túbulo proximal. Essa linhagem celular é amplamente utilizada em pesquisas na área de nefrologia, especialmente em estudos sobre fisiologia renal, toxicologia e fisiopatologia. As células NRK-52E apresentam morfologia epitelial característica, com junções apertadas, o que as torna adequadas para a modelagem in vitro da função tubular renal e da integridade da barreira.
As células NRK-52E têm sido fundamentais no estudo de mecanismos de apoptose, reparo celular e transporte iônico. Por exemplo, a linhagem celular tem sido utilizada para investigar os efeitos do ácido okadaico, um inibidor da proteína fosfatase, revelando seu papel na indução de vias apoptóticas envolvendo condensação da cromatina, influxo de cálcio e alterações mitocondriais. Esses estudos proporcionaram insights sobre a regulação da morte celular renal e os mecanismos de sobrevivência durante lesões ou doenças.
Além disso, as células NRK-52E têm sido utilizadas para avaliar o transporte iônico epitelial renal e as propriedades de barreira em diversas configurações experimentais, como sistemas microfluídicos que simulam condições fisiológicas de fluxo. Isso inclui pesquisas sobre a reabsorção de cloreto de sódio e a resistência elétrica transepitelial, que são fundamentais para a compreensão do equilíbrio eletrolítico e hídrico na fisiologia renal. Essas características tornam as células NRK-52E um modelo robusto para a exploração da biologia das células tubulares renais e de intervenções terapêuticas em doenças renais.
- Tissue
- Rim
- Synonyms
- NRK 52E
- NRK52E
- NRK clone 52E
- Normal Rat Kidney-52E
- NRK-E52
02Classification
- Organism
- Rat
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Epithelial
04Identifiers
- Citation
- NRK-52E (número de catálogo da Cytion 305196)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0468
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Breed / subspecies
- Osborne-Mendel
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes