Skip to content
NRK-52E
Tissue
ไต
Synonyms
NRK 52E, NRK52E, NRK clone 52E, Normal Rat Kidney-52E, NRK-E52

Documents

NRK-52E

Cell line · Product number 305196

The NRK-52E cell line, derived from the normal kidney of a rat, is an epithelioid cell line representing proximal tubular epithelial cells. This cell line...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ NRK-52E ซึ่งได้มาจากไตปกติของหนู เป็นเซลล์ไลน์ชนิดเอพิธีเลียวอยด์ที่แทนเซลล์เยื่อบุผิวท่อไตส่วนต้น เซลล์ไลน์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านโรคไต โดยเฉพาะการศึกษาเกี่ยวกับสรีรวิทยาของไต พิษวิทยา และพยาธิสรีรวิทยา เซลล์ NRK-52E แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวที่มีช่องว่างระหว่างเซลล์แน่นหนา ทำให้เหมาะสำหรับการจำลองการทำงานของท่อไตและความสมบูรณ์ของเกราะป้องกันในหลอดทดลอง

เซลล์ NRK-52E มีบทบาทสำคัญในการศึกษาเกี่ยวกับกลไกของการตายแบบอะพอพโทซิส การซ่อมแซมเซลล์ และการขนส่งไอออน ตัวอย่างเช่น สายเซลล์นี้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาผลของโอคาไดอิกแอซิด ซึ่งเป็นตัวยับยั้งโปรตีนฟอสฟาเตส โดยเผยให้เห็นบทบาทของมันในการกระตุ้นเส้นทางอะพอพโทซิสที่เกี่ยวข้องกับการควบแน่นของโครมาติน การไหลเข้าของแคลเซียม และการเปลี่ยนแปลงของไมโทคอนเดรีย การศึกษาเหล่านี้ได้ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการควบคุมการตายและการอยู่รอดของเซลล์ไตในระหว่างการบาดเจ็บหรือโรค

นอกจากนี้ เซลล์ NRK-52E ยังถูกนำมาใช้ในการประเมินการขนส่งไอออนและคุณสมบัติของเยื่อบุผิวไตภายใต้การตั้งค่าการทดลองต่างๆ เช่น ระบบไมโครฟลูอิดิกที่จำลองสภาวะการไหลทางสรีรวิทยา ซึ่งรวมถึงการวิจัยเกี่ยวกับการดูดซึมกลับของโซเดียมคลอไรด์และความต้านทานไฟฟ้าข้ามเยื่อบุผิว ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญในการทำความเข้าใจสมดุลของอิเล็กโทรไลต์และน้ำในสรีรวิทยาของไต คุณลักษณะเหล่านี้ทำให้ NRK-52E เป็นแบบจำลองที่แข็งแกร่งสำหรับการสำรวจชีววิทยาของเซลล์ท่อไตและการแทรกแซงทางบำบัดในโรคไต

Tissue
ไต
Synonyms
  • NRK 52E
  • NRK52E
  • NRK clone 52E
  • Normal Rat Kidney-52E
  • NRK-E52

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
NRK-52E (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305196)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0468

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
ออสบอร์น-เมนเดล