- Tissue
- ערמונית
- Synonyms
- RWPE1
Documents
RWPE-1
Cell line · Product number 305217
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים RWPE-1, שמקורו באפיתל הערמונית של גבר לבן בן 54 ללא עדות לסרטן הערמונית, הוא משאב יקר ערך במחקר ביו-רפואי, במיוחד במחקרים על ביולוגיה של הערמונית וסרטן. תאים אפיתל אלה, המאופיינים בתכונות צמיחה הדבקות ובמורפולוגיה אפיתלית טיפוסית, הונצחו באמצעות רטרו-וירוס חסר שכפול הנושא את הגן E7 מנגיף הפפילומה האנושי 18 (HPV-18), המנטרל את חלבון הרטינובלסטומה ומקדם הנצחת תאים.
תאי RWPE-1, שמקורם בערמונית אנושית תקינה, משמשים במחקר על סרטן הערמונית, אף על פי שהביטוי של קולטני האנדרוגן בהם הוא צנוע יחסית, במיוחד בהשוואה לקווי תאים שמקורם בסרטן הערמונית. קו התאים האפיתל RWPE-1 מבטא ציטוקרטין 8 ו-18, המאשרים את השושלת האפיתלית שלהם. בעוד שתאי RWPE-1 אכן מבטאים מדכאי גידולים כגון p53 ו-pRB, המשקפים את אופייהם הלא-סרטני, הביטוי של סמנים ספציפיים לערמונית כגון Kallikrein 3 (KLK3) או PSA הוא בדרך כלל נמוך או נעדר בתנאי תרבית סטנדרטיים.
בתרבויות תלת-ממדיות, כגון אלה שנוצרו ב-Matrigel, תאי RWPE-1 אנושיים יכולים להתארגן במבנים אצינריים המזכירים את המבנה הנורמלי של הערמונית. בכל הנוגע להפרשת PSA (אנטיגן ספציפי לערמונית) בתגובה לגירוי אנדרוגני, תאי RWPE-1 מראים תגובה פחות בולטת בהשוואה לקווי תאים של סרטן הערמונית. לכן, בעוד שתאי RWPE-1 מהווים מודל חשוב להבנת המאפיינים הבסיסיים של תאי אפיתל ערמונית נורמליים.
אופיים הלא-ממאיר של תאי RWPE-1 משמש מודל לחקר המעבר לשינוי ממאיר והדינמיקה של תאי סרטן, כולל תאי סרטן הערמונית הגרורתיים וקרצינוגנזה של הערמונית. הכללת גורמים כמו EGF והורמון גדילה בתנאי התרבית יכולה להבהיר עוד יותר את המסלולים המעורבים בהיפרפלזיה של הערמונית ובהתקדמות לכיוון סרטן הערמונית. לסיכום, תאי RWPE-1 מאפשרים הבנה מקיפה של סרטן הערמונית, מהתחלתו בקווי תאים של הערמונית ועד להתבטאותו בחולי סרטן הערמונית.
- Tissue
- ערמונית
- Synonyms
- RWPE1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
- Cell type
- תא אפיתל של הערמונית
- Karyotype
- לתאי RWPE-1 יש פלואידיות כרומוזומלית דיפלואידית, והם מציגים וריאציות כרומוזומליות כגון 45, X,-Y, ו-51, XY.
04Identifiers
- Citation
- RWPE-1 (מספר קטלוגי Cytion 305217)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3791
05Handling and culture
- Culture medium
- K-SFM (אנו לא מספקים מוצר זה; אנא פנה לספקים אחרים. אנא הודע לנו אם אתה זקוק לעזרה נוספת)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 0.05 מ"ג/מ"ל BPE, 5 נ"ג/מ"ל EGF. אין לסנן את התמיסה במלואה. הוסף BPE ו-EGF ל-10 מ"ל, ולאחר סינון סטרילי, הוסף תערובת זו לתמיסה.
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 54 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes