Skip to content
Tissue
ערמונית
Synonyms
RWPE1

Documents

RWPE-1

Cell line · Product number 305217

US$450.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים RWPE-1, שמקורו באפיתל הערמונית של גבר לבן בן 54 ללא עדות לסרטן הערמונית, הוא משאב יקר ערך במחקר ביו-רפואי, במיוחד במחקרים על ביולוגיה של הערמונית וסרטן. תאים אפיתל אלה, המאופיינים בתכונות צמיחה הדבקות ובמורפולוגיה אפיתלית טיפוסית, הונצחו באמצעות רטרו-וירוס חסר שכפול הנושא את הגן E7 מנגיף הפפילומה האנושי 18 (HPV-18), המנטרל את חלבון הרטינובלסטומה ומקדם הנצחת תאים.

תאי RWPE-1, שמקורם בערמונית אנושית תקינה, משמשים במחקר על סרטן הערמונית, אף על פי שהביטוי של קולטני האנדרוגן בהם הוא צנוע יחסית, במיוחד בהשוואה לקווי תאים שמקורם בסרטן הערמונית. קו התאים האפיתל RWPE-1 מבטא ציטוקרטין 8 ו-18, המאשרים את השושלת האפיתלית שלהם. בעוד שתאי RWPE-1 אכן מבטאים מדכאי גידולים כגון p53 ו-pRB, המשקפים את אופייהם הלא-סרטני, הביטוי של סמנים ספציפיים לערמונית כגון Kallikrein 3 (KLK3) או PSA הוא בדרך כלל נמוך או נעדר בתנאי תרבית סטנדרטיים.

בתרבויות תלת-ממדיות, כגון אלה שנוצרו ב-Matrigel, תאי RWPE-1 אנושיים יכולים להתארגן במבנים אצינריים המזכירים את המבנה הנורמלי של הערמונית. בכל הנוגע להפרשת PSA (אנטיגן ספציפי לערמונית) בתגובה לגירוי אנדרוגני, תאי RWPE-1 מראים תגובה פחות בולטת בהשוואה לקווי תאים של סרטן הערמונית. לכן, בעוד שתאי RWPE-1 מהווים מודל חשוב להבנת המאפיינים הבסיסיים של תאי אפיתל ערמונית נורמליים.

אופיים הלא-ממאיר של תאי RWPE-1 משמש מודל לחקר המעבר לשינוי ממאיר והדינמיקה של תאי סרטן, כולל תאי סרטן הערמונית הגרורתיים וקרצינוגנזה של הערמונית. הכללת גורמים כמו EGF והורמון גדילה בתנאי התרבית יכולה להבהיר עוד יותר את המסלולים המעורבים בהיפרפלזיה של הערמונית ובהתקדמות לכיוון סרטן הערמונית. לסיכום, תאי RWPE-1 מאפשרים הבנה מקיפה של סרטן הערמונית, מהתחלתו בקווי תאים של הערמונית ועד להתבטאותו בחולי סרטן הערמונית.

Tissue
ערמונית
Synonyms
  • RWPE1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Cell type
תא אפיתל של הערמונית
Karyotype
לתאי RWPE-1 יש פלואידיות כרומוזומלית דיפלואידית, והם מציגים וריאציות כרומוזומליות כגון 45, X,-Y, ו-51, XY.

04Identifiers

Citation
RWPE-1 (מספר קטלוגי Cytion 305217)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3791

05Handling and culture

Culture medium
K-SFM (אנו לא מספקים מוצר זה; אנא פנה לספקים אחרים. אנא הודע לנו אם אתה זקוק לעזרה נוספת)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 0.05 מ"ג/מ"ל BPE, 5 נ"ג/מ"ל EGF. אין לסנן את התמיסה במלואה. הוסף BPE ו-EGF ל-10 מ"ל, ולאחר סינון סטרילי, הוסף תערובת זו לתמיסה.
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
54 שנים
Ethnicity
קווקזי