RWPE-1

RWPE-1-cellelinjen, der stammer fra prostataepitelet hos en 54-årig kaukasisk mand uden tegn på prostatakræft, er en værdifuld ressource i biomedicinsk forskning, især til undersøgelser af prostatabiologi og -kræft. Disse epitelceller, der er kendetegnet ved deres adhærente vækstegenskaber og typiske epitelmorfologi, blev udødeliggjort ved hjælp af et replikationsdeficient retrovirus, der bærer E7-genet fra human papillomavirus 18 (HPV-18), som inaktiverer retinoblastomproteinet og fremmer cellulær udødeliggørelse.

RWPE-1-celler, der stammer fra en normal menneskelig prostata, bruges i forskning i prostatakræft, selv om deres androgenreceptorudtryk er relativt beskedent, især når man sammenligner med tumorigeniske cellelinjer, der stammer fra prostatakræft. Den epiteliale cellelinje RWPE-1 udtrykker cytokeratiner 8 og 18, som bekræfter deres epiteliale afstamning. Mens RWPE-1-celler udtrykker tumorundertrykkere som p53 og pRB, hvilket afspejler deres ikke-tumorigeniske natur, er udtrykket af prostataspecifikke markører som Kallikrein 3 (KLK3) eller PSA generelt lavt eller fraværende under standardkulturbetingelser.

I 3D-kulturer, som dem der dannes i Matrigel, kan menneskeceller RWPE-1 organisere sig i acinære strukturer, der minder om normal prostata-arkitektur. Når det gælder udskillelsen af PSA (prostataspecifikt antigen) som reaktion på androgenstimulering, viser RWPE-1-celler en mindre udtalt reaktion sammenlignet med cellelinjer fra prostatakræft. Derfor er RWPE-1-celler en værdifuld model til at forstå normale prostataepitelcellers grundlæggende egenskaber.

RWPE-1's ikke-tumorigeniske natur fungerer som en model til at studere overgangen til tumorigenisk transformation og dynamikken i kræftceller, herunder metastatiske prostatacancerceller og prostatakarcinogenese. Inddragelse af faktorer som EGF og væksthormon i dyrkningsbetingelserne kan yderligere belyse de veje, der er involveret i prostatahyperplasi og udviklingen mod prostatakræft. Sammenfattende kan man sige, at RWPE-1-celler fremmer en omfattende forståelse af prostatakræft, lige fra dens opståen i prostatacellelinjer til dens manifestation hos prostatakræftpatienter.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring