RWPE-1

เซลล์ไลน์ RWPE-1 ซึ่งได้มาจากเยื่อบุผิวของต่อมลูกหมากของชายชาวคอเคเซียนอายุ 54 ปีที่ไม่มีหลักฐานของมะเร็งต่อมลูกหมาก เป็นทรัพยากรที่มีคุณค่าในการวิจัยทางชีวการแพทย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับชีววิทยาของต่อมลูกหมากและมะเร็งต่อมลูกหมากเซลล์เยื่อบุผิวเหล่านี้มีลักษณะเด่นคือคุณสมบัติการเจริญเติบโตแบบเกาะติดและรูปร่างลักษณะเฉพาะของเยื่อบุผิว โดยถูกทำให้เป็นอมตะด้วยการใช้เรโทรไวรัสที่ขาดความสามารถในการจำลองตัวเอง ซึ่งพกพาพันธุกรรม E7 จากเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมาไวรัส 18 (HPV-18) ซึ่งจะทำให้โปรตีนเรตินอบลาสโตมาไม่ทำงานและส่งเสริมการเป็นอมตะของเซลล์

เซลล์ RWPE-1 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากต่อมลูกหมากมนุษย์ปกติ ถูกนำมาใช้ในการวิจัยมะเร็งต่อมลูกหมาก แม้ว่าการแสดงออกของตัวรับแอนโดรเจนในเซลล์เหล่านี้จะค่อนข้างต่ำ โดยเฉพาะเมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ไลน์ที่ได้จากมะเร็งต่อมลูกหมากชนิดก่อเนื้องอกเซลล์ไลน์ RWPE-1 ซึ่งเป็นเซลล์เยื่อบุผิว แสดงการแสดงออกของไซโตเคราติน 8 และ 18 ซึ่งยืนยันถึงสายพันธุ์เยื่อบุผิวของพวกมัน ในขณะที่เซลล์ RWPE-1 แสดงการยับยั้งการเกิดเนื้องอก เช่น p53 และ pRB ซึ่งสะท้อนถึงลักษณะที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกของพวกมัน การแสดงออกของเครื่องหมายเฉพาะต่อต่อมลูกหมาก เช่น Kallikrein 3 (KLK3) หรือ PSA โดยทั่วไปจะต่ำหรือไม่มีอยู่ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐาน

ในวัฒนธรรม 3 มิติ เช่น ที่เกิดขึ้นใน Matrigel เซลล์มนุษย์ RWPE-1 สามารถจัดระเบียบตัวเองเป็นโครงสร้างอะซินาร์ที่คล้ายกับสถาปัตยกรรมของต่อมลูกหมากปกติ เมื่อพูดถึงการหลั่ง PSA (Prostate-Specific Antigen) เพื่อตอบสนองต่อการกระตุ้นของแอนโดรเจน เซลล์ RWPE-1 แสดงปฏิกิริยาที่น้อยกว่าเมื่อเทียบกับสายพันธุ์เซลล์มะเร็งต่อมลูกหมาก ดังนั้น ในขณะที่เซลล์ RWPE-1 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการทำความเข้าใจคุณสมบัติพื้นฐานของเซลล์เยื่อบุผิวต่อมลูกหมากปกติ

ลักษณะที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกของ RWPE-1 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาการเปลี่ยนแปลงไปสู่การกลายพันธุ์เป็นเนื้องอกและพลวัตของเซลล์มะเร็ง รวมถึงเซลล์มะเร็งต่อมลูกหมากที่แพร่กระจายและการเกิดมะเร็งต่อมลูกหมากการรวมปัจจัยเช่น EGF และฮอร์โมนการเจริญเติบโตในสภาวะการเพาะเลี้ยงสามารถอธิบายเพิ่มเติมเกี่ยวกับเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตของต่อมลูกหมากและการพัฒนาไปสู่โรคมะเร็งต่อมลูกหมากได้ สรุปได้ว่า เซลล์ RWPE-1 ช่วยให้เข้าใจอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับโรคมะเร็งต่อมลูกหมาก ตั้งแต่การเริ่มต้นในเซลล์ของต่อมลูกหมากไปจนถึงการปรากฎในผู้ป่วยโรคมะเร็งต่อมลูกหมาก

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.