RWPE-1

Celična linija RWPE-1, pridobljena iz epitelija prostate 54-letnega kavkaškega moškega brez znakov raka prostate, je dragocen vir v biomedicinskih raziskavah, zlasti za študije o biologiji in raku prostate. Te epitelijske celice, za katere so značilne adherentne rastne lastnosti in tipična epitelijska morfologija, so bile imortalizirane z uporabo retrovirusa s pomanjkljivo replikacijo, ki nosi gen E7 iz človeškega papiloma virusa 18 (HPV-18), ki inaktivira protein retinoblastoma in spodbuja celično imortalizacijo.

Celice RWPE-1, ki izvirajo iz normalne človeške prostate, se uporabljajo pri raziskavah raka prostate, čeprav je njihovo izražanje androgenih receptorjev razmeroma skromno, zlasti v primerjavi s tumorigenimi celičnimi linijami, ki izvirajo iz raka prostate. Epitelijska celična linija RWPE-1 izraža citokeratina 8 in 18, ki potrjujeta njeno epitelijsko linijo. Čeprav celice RWPE-1 izražajo tumorske supresorje, kot sta p53 in pRB, kar kaže na njihovo netumorigeno naravo, je izražanje za prostato specifičnih označevalcev, kot sta kalikrein 3 (KLK3) ali PSA, v standardnih pogojih gojenja na splošno nizko ali ga ni.

V 3D-kulturah, kot so tiste v Matrigeli, se lahko človeške celice RWPE-1 organizirajo v acinarne strukture, ki spominjajo na normalno zgradbo prostate. Pri izločanju PSA (prostatičnega specifičnega antigena) kot odzivu na androgeno stimulacijo celice RWPE-1 kažejo manj izrazito reakcijo v primerjavi s celičnimi linijami raka prostate. Zato so celice RWPE-1 dragocen model za razumevanje osnovnih lastnosti normalnih epitelijskih celic prostate.

Ker celice RWPE-1 niso tumorogene, služijo kot model za preučevanje prehoda v tumorigeno transformacijo in dinamike rakavih celic, vključno z metastatskimi celicami raka prostate in kancerogenezo prostate. Z vključitvijo dejavnikov, kot sta EGF in rastni hormon, v pogoje gojenja lahko dodatno pojasnimo poti, ki so vključene v hiperplazijo prostate in napredovanje v raka prostate. Če povzamemo, celice RWPE-1 omogočajo celovito razumevanje raka prostate, od njegovega nastanka v celičnih linijah prostate do pojavljanja pri bolnikih z rakom prostate.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo