RWPE-1

Az RWPE-1 sejtvonal, amely egy 54 éves kaukázusi férfi prosztata epitéljéből származik, és nincs nyoma prosztataráknak, értékes erőforrás az orvosbiológiai kutatásban, különösen a prosztata biológiájának és rákjának vizsgálatához. Ezeket a hámsejteket, amelyeket tapadási növekedési tulajdonságaik és tipikus hámmorfológiájuk jellemez, egy olyan replikációhiányos retrovírus segítségével immortalizálták, amely a humán papillomavírus 18 (HPV-18) E7 génjét hordozza, amely inaktiválja a retinoblasztóma fehérjét és elősegíti a sejtek immortalizációját.

A normális emberi prosztatából származó RWPE-1 sejteket a prosztatarák kutatásában használják, bár androgénreceptor-expressziójuk viszonylag szerény, különösen a tumorigén prosztatarákból származó sejtvonalakhoz képest. Az RWPE-1 epitél sejtvonal expresszálja a 8-as és 18-as citokeratinokat, amelyek megerősítik epitélvonalukat. Míg az RWPE-1 sejtek expresszálnak tumorszupresszorokat, például a p53-at és a pRB-t, ami nem tumorigén jellegüket tükrözi, a prosztata-specifikus markerek, például a Kallikrein 3 (KLK3) vagy a PSA expressziója általában alacsony vagy hiányzik standard tenyésztési körülmények között.

3D kultúrákban, például Matrigelben kialakított kultúrákban az RWPE-1 humán sejtek a normális prosztata architektúrára emlékeztető acináris struktúrákba szerveződhetnek. Ami a PSA (prosztata-specifikus antigén) kiválasztását illeti androgén stimulációra adott válaszként, az RWPE-1 sejtek kevésbé kifejezett reakciót mutatnak a prosztatarákos sejtvonalakhoz képest. Ezért, míg az RWPE-1 sejtek értékes modellt kínálnak a normál prosztata epitélsejtek alaptulajdonságainak megértéséhez.

Az RWPE-1 nem tumorigén jellege modellként szolgál a tumorigén átalakulásba való átmenet és a rákos sejtek dinamikájának tanulmányozására, beleértve a metasztatikus prosztatarák sejteket és a prosztata karcinogenezist. Az olyan faktorok, mint az EGF és a növekedési hormon beillesztése a tenyésztési körülményekbe tovább tisztázhatja a prosztata hiperpláziában és a prosztatarák felé történő progresszióban szerepet játszó útvonalakat. Összefoglalva, az RWPE-1 sejtek megkönnyítik a prosztatarák átfogó megértését, a prosztata sejtvonalakban való kialakulásától a prosztatarákos betegekben való megnyilvánulásáig.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban