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ティッシュ
前立腺
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RWPE1

RWPE-1

Cell line · 製品番号 305217

€650.00税・送料別

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  • CoA
1

01概要

説明

RWPE-1細胞株は、前立腺癌の所見がない54歳の白人男性の前立腺上皮に由来し、生物医学研究、特に前立腺の生物学と癌の研究において貴重な資源である。付着増殖特性と典型的な上皮形態を特徴とするこれらの上皮細胞は、レチノブラストーマタンパク質を不活性化し細胞の不死化を促進するヒトパピローマウイルス18(HPV-18)由来のE7遺伝子を持つ複製欠損レトロウイルスを用いて不死化された。

正常なヒト前立腺に由来するRWPE-1細胞は、前立腺がん研究に利用されているが、そのアンドロゲン受容体発現は、特に腫瘍性の前立腺がん由来細胞株と比較すると、比較的控えめである。上皮細胞株RWPE-1は、サイトケラチン8と18を発現しており、上皮系であることを裏付けている。RWPE-1細胞は、p53やpRBのような腫瘍抑制因子を発現しており、非腫瘍原性の性質を反映しているが、カリクレイン3(KLK3)やPSAのような前立腺特異的マーカーの発現は、標準的な培養条件下では一般に低いか存在しない。

マトリゲル中で形成されるような3D培養では、ヒト細胞RWPE-1は、正常な前立腺構造を思わせるアシナー構造に組織化することができる。アンドロゲン刺激に対するPSA(前立腺特異抗原)の分泌に関しては、RWPE-1細胞は前立腺がん細胞株と比較して、あまり顕著な反応を示さない。従って、RWPE-1細胞は正常前立腺上皮細胞のベースライン特性を理解するための貴重なモデルとなる。

RWPE-1の非腫瘍原性の性質は、転移性前立腺ガン細胞や前立腺ガン発生を含む、腫瘍原性形質転換への移行やガン細胞の動態を研究するモデルとして役立つ。培養条件にEGFや成長ホルモンのような因子を含めることで、前立腺肥大症や前立腺がんへの進展に関与する経路をさらに解明することができる。要約すると、RWPE-1細胞は、前立腺細胞株における前立腺癌の発生から前立腺癌患者におけるその発現に至るまで、前立腺癌の包括的な理解を促進する。

ティッシュ
前立腺
同義語
  • RWPE1

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
細胞の種類
前立腺上皮細胞
核型
RWPE-1細胞は2倍体の染色体を持っており、45,X,-Y,51,XYのような染色体変異を示す。

04識別子

引用
RWPE-1 (Cytion カタログ番号 305217)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_3791

05取り扱いと飼育

培地
K-SFM(弊社では取り扱っておりません。ご不明な点がございましたらご連絡ください)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に0.05mg/mL BPE、5ng/mL EGFを補充する。培地は完全に濾過してはならない。BPEとEGFを10mLに添加し、滅菌濾過後、この混合物を培地に混ぜる。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
54年
民族
白人