RWPE-1

RWPE-1 rakuliin, mis on saadud 54-aastase kaukaasia mehe eesnäärme epiteelist, kellel ei ole tõendeid eesnäärmevähi kohta, on väärtuslik ressurss biomeditsiinilistes uuringutes, eriti eesnäärme bioloogia ja vähi uurimisel. Need epiteelirakud, mida iseloomustavad nende adhesiivsed kasvuomadused ja tüüpiline epiteeli morfoloogia, immortaliseeriti, kasutades replikatsioonipuudulikku retroviirust, mis kannab inimese papilloomiviiruse 18 (HPV-18) E7 geeni, mis inaktiveerib retinoblastoomi valgu ja soodustab rakkude immortaliseerumist.

RWPE-1 rakke, mis pärinevad inimese normaalsest eesnäärmest, kasutatakse eesnäärmevähi uuringutes, kuigi nende androgeeni retseptori ekspressioon on suhteliselt tagasihoidlik, eriti võrreldes eesnäärmevähist pärinevate kasvajaliste rakuliinidega. Epiteelrakuliin RWPE-1 ekspresseerib tsütokeratiini 8 ja 18, mis kinnitab nende epiteeliliini päritolu. Kuigi RWPE-1 rakud ekspresseerivad selliseid kasvajasupressoreid nagu p53 ja pRB, mis näitab nende mittetuumorigeenset iseloomu, on eesnäärme-spetsiifiliste markerite nagu Kallikrein 3 (KLK3) või PSA ekspressioon standardkultuuritingimustes üldiselt madal või puudub.

3D-kultuurides, näiteks Matrigelis, võivad inimese rakud RWPE-1 organiseeruda normaalset eesnäärme arhitektuuri meenutavateks akiinustruktuurideks. Kui tegemist on PSA (prostataspetsiifilise antigeeni) sekretsiooniga vastuseks androgeenide stimuleerimisele, näitavad RWPE-1 rakud eesnäärmevähi rakuliinidega võrreldes vähem väljendunud reaktsiooni. Seega, kuigi RWPE-1 rakud pakuvad väärtuslikku mudelit normaalsete eesnäärme epiteelirakkude põhiomaduste mõistmiseks.

RWPE-1 mittetuumorigeenne olemus on mudeliks, mille abil saab uurida üleminekut tuumorigeenseks transformatsiooniks ja vähirakkude, sealhulgas metastaatiliste eesnäärmevähirakkude ja eesnäärme kartsinogeneesi dünaamikat. Selliste faktorite nagu EGF ja kasvuhormoon lisamine kultuuritingimustesse võib täiendavalt selgitada eesnäärme hüperplaasia ja eesnäärmevähi tekkimise protsessi. Kokkuvõttes hõlbustavad RWPE-1 rakud eesnäärmevähi terviklikku mõistmist, alates selle tekkimisest eesnäärme rakuliinides kuni selle avaldumiseni eesnäärmevähi patsientidel.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest