الانتقال إلى المحتوى
الأنسجة
البروستاتا
المرادفات
RWPE1

المستندات

RWPE-1

Cell line · رقم المنتج 305217

€650.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يعتبر خط خلايا RWPE-1، المشتق من ظهارة البروستاتا لذكر قوقازي يبلغ من العمر 54 عاماً ولا يوجد دليل على إصابته بسرطان البروستاتا، مصدراً قيماً في الأبحاث الطبية الحيوية، خاصةً للدراسات حول بيولوجيا البروستاتا والسرطان. وقد تم تخليد هذه الخلايا الظهارية التي تتميز بخصائص نموها الملتصقة ومورفولوجيا الظهارة النموذجية، باستخدام فيروس ارتجاعي ناقص التكاثر يحمل الجين E7 من فيروس الورم الحليمي البشري 18 (HPV-18)، الذي يعطل بروتين الورم الأرومي الشبكي ويعزز الخلود الخلوي.

تُستخدم خلايا RWPE-1، التي تنشأ من البروستاتا البشرية الطبيعية، في أبحاث سرطان البروستاتا، على الرغم من أن تعبير مستقبلات الأندروجين فيها متواضع نسبيًا، خاصة عند مقارنتها بخطوط الخلايا المستمدة من سرطان البروستاتا الورمي. ويعبّر خط الخلايا الظهارية RWPE-1 عن السيتوكيراتين 8 و18، مما يؤكد سلالتها الظهارية. في حين أن خلايا RWPE-1 تعبر عن مثبطات الورم مثل p53 و pRB، مما يعكس طبيعتها غير الورمية، فإن التعبير عن العلامات الخاصة بالبروستاتا مثل كاليكرين 3 (KLK3) أو PSA منخفض أو غائب بشكل عام في ظل ظروف الاستنبات القياسية.

في مزارع ثلاثية الأبعاد، مثل تلك التي تكونت في ماتريجل، يمكن للخلايا البشرية RWPE-1 أن تنتظم في هياكل أسينار تذكرنا ببنية البروستاتا الطبيعية. عندما يتعلق الأمر بإفراز مستضد البروستاتا النوعي (PSA) استجابةً لتحفيز الأندروجين، تُظهر خلايا RWPE-1 رد فعل أقل وضوحًا مقارنةً بخطوط خلايا سرطان البروستاتا. لذلك، بينما تقدم خلايا RWPE-1 نموذجاً قيماً لفهم الخصائص الأساسية للخلايا الظهارية الطبيعية للبروستاتا.

تُستخدم الطبيعة غير الورمية لخلايا RWPE-1 كنموذج لدراسة التحول إلى التحول الورمي وديناميكيات الخلايا السرطانية، بما في ذلك خلايا سرطان البروستاتا النقيلية وسرطان البروستاتا. يمكن أن يؤدي إدراج عوامل مثل عامل النمو EGF وهرمون النمو في ظروف الاستزراع إلى زيادة توضيح المسارات التي ينطوي عليها تضخم البروستاتا وتطورها نحو سرطان البروستاتا. باختصار، تسهّل خلايا RWPE-1 فهمًا شاملاً لسرطان البروستاتا، بدءًا من بدايته في خطوط خلايا البروستاتا وحتى ظهوره لدى مرضى سرطان البروستاتا.

الأنسجة
البروستاتا
المرادفات
  • RWPE1

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
نوع الخلية
الخلية الظهارية للبروستاتا
النمط الكروموسومي
تحتوي خلايا RWPE-1 على صبغيات كروموسومية ثنائية الصبغيات الصبغية، وتظهر اختلافات كروموسومية مثل 45، X، Y، و51، XY.

04المعرّفات

المرجع
RWPE-1 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305217)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_3791

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
K-SFM (نحن لا نوفر هذا المنتج؛ يُرجى التفكير في موردين آخرين. يرجى إعلامنا إذا كنت بحاجة إلى مزيد من المساعدة)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 0.05 ملغم/ملليتر من BPE، و5 نانوغرام/ملليتر من عامل النمو EGF. يجب عدم ترشيح الوسط بالكامل. أضف BPE وEGF إلى 10 مل، وبعد الترشيح المعقم، ادمج هذا الخليط في الوسط.
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
54 سنة
الأصل العرقي
قوقازي