RWPE-1

RWPE-1-solulinja, joka on peräisin 54-vuotiaan valkoihoisen miehen eturauhasen epiteelistä, jolla ei ole merkkejä eturauhassyövästä, on arvokas resurssi biolääketieteellisessä tutkimuksessa, erityisesti eturauhasen biologiaa ja syöpää koskevissa tutkimuksissa. Nämä epiteelisolut, joille on ominaista adheesiokasvuominaisuudet ja tyypillinen epiteelimorfologia, immortalisoitiin käyttämällä replikaatiopuutteista retrovirusta, joka kantaa ihmisen papilloomavirus 18:n (HPV-18) E7-geeniä, joka inaktivoi retinoblastoomaproteiinin ja edistää solujen kuolemattomuutta.

RWPE-1-soluja, jotka ovat peräisin ihmisen normaalista eturauhasesta, käytetään eturauhassyövän tutkimuksessa, vaikka niiden androgeenireseptorin ilmentyminen on suhteellisen vaatimatonta, erityisesti verrattuna tumorigeenisiin eturauhassyöpäperäisiin solulinjoihin. Epiteelisolulinja RWPE-1 ilmentää sytokeratiineja 8 ja 18, jotka vahvistavat sen epiteelilinjan. RWPE-1-solut ilmentävät kasvainsuppressoreita, kuten p53:a ja pRB:tä, mikä kuvastaa niiden ei-tuumorigeenistä luonnetta, mutta eturauhaspesifisten merkkiaineiden, kuten Kallikrein 3:n (KLK3) tai PSA:n, ilmentyminen on yleensä vähäistä tai puuttuu kokonaan tavanomaisissa viljelyolosuhteissa.

3D-viljelmissä, kuten Matrigeliin muodostetuissa viljelmissä, ihmisen RWPE-1-solut voivat järjestäytyä acinarirakenteiksi, jotka muistuttavat normaalia eturauhasen arkkitehtuuria. RWPE-1-solut erittävät PSA:ta (eturauhasspesifinen antigeeni) vastauksena androgeenistimulaatioon, ja niiden reaktio on vähäisempi kuin eturauhassyöpäsolulinjojen. Näin ollen RWPE-1-solut tarjoavat arvokkaan mallin normaalien eturauhasen epiteelisolujen perusominaisuuksien ymmärtämiseksi.

RWPE-1:n ei-tuumorigeeninen luonne toimii mallina tutkittaessa siirtymistä tumorigeeniseen transformaatioon ja syöpäsolujen dynamiikkaa, mukaan lukien metastaattiset eturauhassyöpäsolut ja eturauhasen karsinogeneesi. Ottamalla viljelyolosuhteisiin mukaan EGF:n ja kasvuhormonin kaltaisia tekijöitä voidaan edelleen selvittää eturauhasen liikakasvuun ja eturauhassyövän etenemiseen liittyviä reittejä. Yhteenvetona voidaan todeta, että RWPE-1-solut helpottavat eturauhassyövän kokonaisvaltaista ymmärtämistä sen alkamisesta eturauhassolulinjoissa aina sen ilmenemiseen eturauhassyöpäpotilailla.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa