الانتقال إلى المحتوى
EB3
الأنسجة
العظام
المرض
لمفومة بوركيت
موقع الانتشار
العظام
المرادفات
EB-3, Epstein-Barr-3, GM04679

المستندات

EB3

Cell line · رقم المنتج 300373

The EB3 cell line is a human Burkitt lymphoma model that was originally derived from a young child with a maxillary tumor in Uganda. It is one of several ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي EB3 هو نموذج لورم لمفومة بوركيت البشري الذي تم اشتقاقه في الأصل من طفل صغير مصاب بورم في الفك العلوي في أوغندا. وهو واحد من عدة خطوط خلايا لمفومة بوركيت التي تم إنشاؤها خلال التحقيقات المبكرة في الخصائص المناعية والبيولوجية لهذا الورم الخبيث. والجدير بالذكر أن خلايا EB3 تعبر عن تفاعل مناعي غشائي قوي عند اختبارها بمصل مرضى لمفومة بوركيت في مرحلة التعافي بعد العلاج الكيميائي، مما يشير إلى وجود مستضدات مرتبطة بالورم على سطحها. من المحتمل أن يكون هذا التفاعل بوساطة الأجسام المضادة من فئة IgG، كما هو موضح باستخدام الكواشف المضادة للجلوكوزين المترافق بالفلورسين. وُجد أن خلايا EB3 تتفاعل بقوة مع سلالات أخرى مشتقة من بوركيت مثل جيجوي وB35M وSL1، في حين أن بعض سلالات بوركيت الأخرى، مثل راجي، لم تُظهر تفاعلاً مماثلاً في ظل الظروف نفسها.

كانت خلايا EB3 من بين الخلايا المستخدمة في الدراسات المقارنة المبكرة للتمييز بين الاستجابات الخاصة بالورم والاستجابات المتساوية في لمفومة بوركيت. أظهرت هذه الدراسات أن الأمصال المأخوذة من بعض المرضى - خاصةً أولئك الذين هم في حالة مغفرة كاملة - يمكنها التعرف بشكل انتقائي على خلايا لمفومة بوركيت على خلايا لمفومة بوركيت مقارنةً بخلايا نخاع العظم الطبيعية أو الخلايا الليمفاوية من نفس المتبرع، مما يشير إلى وجود علامات مناعية خاصة بالورم. وبالإضافة إلى ذلك، أظهرت خلايا EB3 سمات مورفولوجية ومناعية تتفق مع خلايا لمفومة بوركيت اللمفاوية الكبيرة الشبيهة بخلايا لمفومة بوركيت، والتي تميل إلى إظهار تلطيخ غشائي حبيبي لامع عند تعرضها للمصل التفاعلي. ساعد هذا التنميط المناعي التاريخي للورم اللمفاوي EB3 في إرساء الأساس لدراسات لاحقة لاستكشاف المستضدات الخاصة بالورم في الأورام اللمفاوية الخبيثة.

الأنسجة
العظام
المرض
لمفومة بوركيت
موقع الانتشار
العظام
التطبيقات
زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، علم المناعة، علم المناعة
المرادفات
  • EB-3
  • Epstein-Barr-3
  • GM04679

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة اللمفاوية
نوع الخلية
الخلايا اللمفاوية ب

04المعرّفات

المرجع
EB3 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300373)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1185

05التعبير والقابلية للإصابة

المستضدات السطحية
HLA A3، Aw32، Cw2
الإيزوزيمات
G6PD، أ
الفيروسات
فيروس الورم الحليمي البكتيري الموضعي (EBNA pos)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
إعادة الاستنبات
قم بتجانس معلق الخلايا في القارورة برفق عن طريق السحب لأعلى ولأسفل باستخدام الماصة، ثم خذ عينة تمثيلية لتحديد كثافة الخلايا لكل مل. قم بتخفيف المعلق للحصول على تركيز خلايا يبلغ 1 × 105 خلية/مل باستخدام وسط استزراع جديد، وقم بتقسيم المعلق المعدل إلى قوارير جديدة لمزيد من الاستزراع.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
3 سنوات
الأصل العرقي
أفريقي