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EB3
Gewebe
Knochen
Krankheit
Burkitt-Lymphom
Metastasenherd
Knochen
Synonyme
EB-3, Epstein-Barr-3, GM04679

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EB3

Cell line · Artikelnummer 300373

The EB3 cell line is a human Burkitt lymphoma model that was originally derived from a young child with a maxillary tumor in Uganda. It is one of several ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die EB3-Zelllinie ist ein menschliches Burkitt-Lymphom-Modell, das ursprünglich von einem Kleinkind mit einem Kiefertumor in Uganda stammt. Sie ist eine von mehreren etablierten Burkitt-Lymphom-Zelllinien, die im Rahmen früher Untersuchungen zu den immunologischen und biologischen Merkmalen dieser bösartigen Erkrankung entwickelt wurden. Bemerkenswert ist, dass EB3-Zellen eine starke Membran-Immunfluoreszenz-Reaktivität zeigen, wenn sie mit Serum von Burkitt-Lymphom-Patienten in Remission nach einer Chemotherapie untersucht werden, was auf das Vorhandensein von tumorassoziierten Antigenen auf ihrer Oberfläche hindeutet. Diese Reaktivität wird wahrscheinlich durch Antikörper der Klasse IgG vermittelt, wie mit Fluorescein-konjugierten Anti-IgG-Reagenzien nachgewiesen wurde. EB3 reagierte stark mit anderen Burkitt-Linien wie Jijoye, B35M und SL1, während bestimmte andere Burkitt-Linien wie Raji unter denselben Bedingungen keine ähnliche Reaktivität zeigten.

EB3-Zellen gehörten zu den Zellen, die in frühen Vergleichsstudien zur Unterscheidung zwischen tumorspezifischen und isoantigenen Reaktionen bei Burkitt-Lymphomen verwendet wurden. Diese Untersuchungen zeigten, dass Seren von einigen Patienten - insbesondere von solchen in kompletter Remission - selektiv Burkitt-Lymphomzellen gegenüber normalem Knochenmark oder Lymphozyten desselben Spenders erkennen konnten, was auf tumorspezifische immunogene Marker hinweist. Darüber hinaus wiesen EB3-Zellen morphologische und immunphänotypische Merkmale auf, die mit großen lymphoblastenähnlichen Burkitt-Lymphomzellen übereinstimmen, die dazu neigen, eine helle granuläre Membranfärbung zu zeigen, wenn sie reaktivem Serum ausgesetzt sind. Diese historische immunologische Profilierung von EB3 trug dazu bei, die Grundlage für spätere Studien zur Erforschung tumorspezifischer Antigene bei lymphatischen Malignomen zu schaffen.

Gewebe
Knochen
Krankheit
Burkitt-Lymphom
Metastasenherd
Knochen
Anwendungen
3D-Zellkultur, Immunologie
Synonyme
  • EB-3
  • Epstein-Barr-3
  • GM04679

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Lymphoblasten
Zelltyp
B-Lymphozyt

04Bezeichner

Quellenangabe
EB3 (Cytion Katalognummer 300373)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1185

05Expression und Anfälligkeit

Oberflächenantigene
HLA A3, Aw32, Cw2
Isoenzyme
G6PD, A
Viren
EBV (EBNA positiv)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
3 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Afrika