Přejít na obsah
EB3
Tkáň
Kost
Nemoc
Burkittův lymfom
Místo metastázy
Kost
Synonyma
EB-3, Epstein-Barr-3, GM04679

Dokumenty

EB3

Cell line · Číslo výrobku 300373

The EB3 cell line is a human Burkitt lymphoma model that was originally derived from a young child with a maxillary tumor in Uganda. It is one of several ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie EB3 je model lidského Burkitova lymfomu, který byl původně odvozen od malého dítěte s nádorem horní čelisti v Ugandě. Jedná se o jednu z několika zavedených buněčných linií Burkittova lymfomu, které byly vytvořeny během raných výzkumů imunologických a biologických charakteristik této malignity. Pozoruhodné je, že buňky EB3 vykazují silnou membránovou imunofluorescenční reaktivitu při zkoumání se sérem pacientů s Burkittovým lymfomem v remisi po chemoterapii, což naznačuje přítomnost antigenů spojených s nádorem na jejich povrchu. Tato reaktivita je pravděpodobně zprostředkována protilátkami třídy IgG, jak bylo prokázáno pomocí fluoresceinem konjugovaných anti-IgG činidel. Bylo zjištěno, že EB3 silně reaguje spolu s dalšími Burkittovými liniemi, jako jsou Jijoye, B35M a SL1, zatímco některé další Burkittovy linie, jako například Raji, za stejných podmínek podobnou reaktivitu nevykazovaly.

Buňky EB3 patřily k těm, které byly použity v prvních srovnávacích studiích k rozlišení mezi nádorově specifickými a izoantigenními reakcemi u Burkittovy lymfomové linie. Tato šetření prokázala, že séra některých pacientů - zejména těch v kompletní remisi - mohou selektivně rozpoznávat buňky Burkittova lymfomu oproti normální kostní dřeni nebo lymfocytům od stejného dárce, což svědčí o nádorově specifických imunogenních markerech. Buňky EB3 navíc vykazovaly morfologické a imunofenotypové znaky odpovídající velkým lymfoblastům podobným buňkám Burkittova lymfomu, které mají tendenci vykazovat jasné granulární barvení membrány, pokud jsou vystaveny reaktivnímu séru. Toto historické imunologické profilování EB3 pomohlo vytvořit základ pro pozdější studie zkoumající nádorově specifické antigeny u lymfoidních malignit.

Tkáň
Kost
Nemoc
Burkittův lymfom
Místo metastázy
Kost
Aplikace
3D buněčné kultury, Imunologie
Synonyma
  • EB-3
  • Epstein-Barr-3
  • GM04679

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblasty
Typ buňky
B lymfocyty

04Identifikátory

Citace
EB3 (katalogové číslo Cytion 300373)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1185

05Exprese a náchylnost

Povrchové antigeny
HLA A3, Aw32, Cw2
Isoenzymy
G6PD, A
Viry
EBV (EBNA pozitivní)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Subkultivace
Jemně homogenizujte buněčnou suspenzi v baňce pipetováním nahoru a dolů, poté odeberte reprezentativní vzorek pro stanovení buněčné hustoty na ml. Suspenzi zřeďte čerstvým kultivačním médiem tak, aby koncentrace buněk byla 1 x 105 buněk/ml, a upravenou suspenzi rozdělte do nových baňek pro další kultivaci.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
3 roky
Etnická příslušnost
Africké