EB3

A linhagem celular EB3 é um modelo de linfoma de Burkitt humano, originalmente derivado de uma criança pequena com um tumor na mandíbula superior em Uganda. É uma das várias linhagens celulares de linfoma de Burkitt estabelecidas, criadas durante as primeiras investigações sobre as características imunológicas e biológicas dessa neoplasia maligna. Notavelmente, as células EB3 apresentam forte reatividade de imunofluorescência de membrana quando testadas com soro de pacientes com linfoma de Burkitt em remissão após quimioterapia, sugerindo a presença de antígenos associados ao tumor em sua superfície. Essa reatividade é provavelmente mediada por anticorpos da classe IgG, conforme demonstrado com reagentes anti-IgG conjugados com fluoresceína. Verificou-se que a EB3 reagia fortemente juntamente com outras linhagens derivadas do linfoma de Burkitt, como Jijoye, B35M e SL1, enquanto certas outras linhagens de Burkitt, como a Raji, não apresentavam reatividade semelhante nas mesmas condições.

As células EB3 estavam entre as utilizadas nos primeiros estudos comparativos para distinguir entre respostas específicas do tumor e isoantigênicas no linfoma de Burkitt. Essas investigações demonstraram que os soros de alguns pacientes — particularmente aqueles em remissão completa — podiam reconhecer seletivamente as células do linfoma de Burkitt em relação à medula óssea normal ou aos linfócitos do mesmo doador, indicando marcadores imunogênicos específicos do tumor. Além disso, as células EB3 apresentavam características morfológicas e imunofenotípicas consistentes com as células grandes do linfoma de Burkitt, semelhantes a linfoblastos, que tendem a exibir coloração granular intensa na membrana quando expostas ao soro reativo. Esse perfil imunológico histórico das células EB3 ajudou a estabelecer as bases para estudos posteriores que exploraram antígenos específicos do tumor em neoplasias linfóides.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.